TIMOLFTALEIN: KARAKTERISTIK, PERSIAPAN DAN APLIKASI - BIOLOGI - 2025

The thymolphthalein adalah indikator pH dengan yang nama ilmiah: 3,3-bis -isobenzofuranone -1 (3H) dan rumus kimia adalah C ₂₈ H ₃₀ O ₄ . Ini disintesis dari ftalat anhidrida dan timol.

Indikator pH ini memiliki sifat yang sangat khas, karena pada pH yang sangat rendah berwarna merah pekat (pH <0). Selanjutnya ada kisaran pH yang lebar dimana itu sama sekali tidak berwarna (pH 1 - 9,2), dengan kisaran balik antara 9,3 hingga 10,5 dimana dapat berubah menjadi biru, sedangkan di atas 10,5 berwarna biru intens.

Struktur kimia timolftalein pada pH asam (tidak berwarna) dan pada pH basa (biru tua). Sumber: Dannybalanta /Pxhere.com

Aplikasinya termasuk berfungsi sebagai indikator asam-basa dalam reaksi kimia tertentu. Ini juga digunakan sebagai kromogen dalam beberapa reaksi kolorimetri di mana aktivitas enzimatik dievaluasi. Misalnya dalam penentuan alkali fosfatase.

Mengenai toksisitas, ini kurang berbahaya dibandingkan indikator pH lainnya, diklasifikasikan oleh National Fire Protection Association (NFPA) sebagai level 1 dalam kaitannya dengan pengaruhnya terhadap kesehatan; yang berarti tidak karsinogenik atau mutagenik.

Ia juga tidak memiliki toksisitas khusus terhadap organ target mana pun; artinya, ini menunjukkan risiko agresi terhadap kesehatan yang rendah. Namun, kontak langsung dengan kulit dan mukosa dapat menyebabkan iritasi ringan.

Di sisi lain, dalam istilah mudah terbakar ia diklasifikasikan sebagai 1 dan dalam hal reaktivitas sebagai nol.

karakteristik

Indikator pH timolftalein dalam bentuk padat berupa bubuk putih, dalam keadaan cair berwarna merah pekat pada pH kurang dari nol, tidak berwarna pada pH 1-9,2 dan biru di atas 10,5. Massa molar 430,54 g / mol, dengan titik leleh (258 ° C), sedangkan titik didih berkisar antara 248-252 ° C. Densitasnya 0,92 g / mL pada 25 ° C

Ini tidak larut dalam air dingin dan larut dalam etanol. Ini bukan bahan peledak.

Sebagai tindakan pencegahan, selama pengangkutan, penyimpanan dan penanganan harus dijauhkan dari oksidan kuat.

Persiapan

Indikator pH timolftalein pada konsentrasi 0,1% umumnya digunakan untuk analisis volumetrik. Untuk melakukan ini, lakukan sebagai berikut:

- Timbang 100 mg timolftalein dan larutkan dalam 100 ml etil alkohol 95%.

Itu juga bisa disiapkan sebagai berikut:

- Timbang 100 mg timolftalein dan larutkan dalam 60 ml alkohol absolut, lalu tambahkan 40 ml air suling.

- Simpan pada suhu kamar (15 - 25 ° C). Tempat penyimpanan harus sejuk, berventilasi, dan bebas dari kelembaban.

Aplikasi

Penentuan alkali fosfatase

Dalam menentukan tes ini ada teknik yang didasarkan pada aksi hidrolitik yang dimiliki alkali fosfatase terhadap timolftalein monofosfat. Jika terdapat alkali fosfatase, ia akan menghidrolisis timolftalein monofosfat, melepaskan timolthalein.

Ini menghasilkan warna biru pada pH basa. Aktivitas enzimatis alkali fosfatase berbanding lurus dengan intensitas warna yang terbentuk. Absorbansi terbaca pada 590 nm.

Penentuan antigen prostat (PSA)

Dalam hal ini, Shao F dan kolaborator pada tahun 2018 mengembangkan teknik kolorimetri di mana mereka menggunakan nanopartikel silika mesopori yang menjebak molekul timolftalein, yang terikat kuat oleh keberadaan feniltrimetiloksisilan.

Pada gilirannya, nanopartikel ini telah dilapisi dengan polietilenimina (PEI), mendukung pengikatan antibodi anti-PSA sekunder.

Di sisi lain, sampel pasien telah diimobilisasi di atas piring; dan ketika PSA ada dalam kontak dengan partikel nano, itu akan mengikat antibodi. Partikel nano yang tidak mengikat akan dihilangkan.

Selanjutnya, timolftalein akan mudah dilepaskan dengan menambahkan larutan alkali, yang menghasilkan warna biru. Derajat warna berbanding lurus dengan konsentrasi PSA.

Penentuan aktivitas enzim arginin kinase atau fosfokinase

Dengan menggunakan indikator pH timolftalein, aktivitas enzimatik arginin kinase dapat ditentukan. Tes ini didasarkan pada:

Enzim arginin kinase adalah fosfotransferase yang berpartisipasi dalam pembentukan fosfoarginin, seperti yang terungkap dalam reaksi kimia berikut:

Sumber: "Arginine kinase." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 10 Jul 2018, 13:49 UTC. 20 Mei 2019, 03:58 wikipedia.org/

Jika reaksi ini dilakukan terhadap indikator pH timolftalein, dimungkinkan untuk mengukur aktivitas enzim. Hal ini dimungkinkan menurut penjelasan berikut: reaksi terjadi pada pH basa, di mana timolftalein akan menunjukkan warna biru.

Aktivitas enzimatis diukur dengan memudarnya warna yang dipantulkan oleh penurunan absorbansi pada 575 nm, karena ketika enzim bekerja, proton (H +) dilepaskan, yang mengasamkan medium.

Hal ini menyebabkan timolftalein kehilangan warna setelah mendekati zona putar. Jika pH turun di bawah 9,2, itu menjadi sama sekali tidak berwarna.

Oleh karena itu intensitas warna biru berbanding terbalik dengan aktivitas enzim.

Toksisitas

Pada manusia

Senyawa ini kurang toksik daripada kebanyakan indikator pH, karena tidak ada efek karsinogenik atau mutagenik yang dikaitkan dengannya hingga saat ini. Namun, ini tidak sepenuhnya tidak berbahaya: jika bersentuhan dengan kulit dan selaput lendir dapat menyebabkan kemerahan di area yang disebutkan.

Ini juga dapat menghasilkan reaksi yang tidak diinginkan jika tidak sengaja tertelan atau terhirup.

Jika terjadi kontak langsung dengan kulit dan selaput lendir, area yang terkena harus dicuci dengan banyak air setidaknya selama 15 menit. Dan jika mereka melihat tanda-tanda iritasi, mereka harus pergi ke pusat kesehatan terdekat.

Itulah mengapa penggunaan alat pengaman seperti gaun, sarung tangan dan kacamata pengaman sangat dianjurkan saat menangani.

Meskipun memiliki risiko rendah mudah terbakar, disarankan agar Anda menghindari pemantik api.

Dampak terhadap lingkungan

Meskipun kurang beracun bagi kesehatan manusia, ia beracun di lingkungan perairan, memengaruhi organisme yang ditemukan di sana. Selain itu, ia memiliki daya bioakumulasi yang tinggi, dan dalam jangka panjang dimungkinkan terbentuk produk degradasi yang berbahaya bagi lingkungan.

Oleh karena itu, produk ini harus dihindari jika mencapai permukaan atau air bawah tanah, karena akan mempengaruhi air minum.

Dalam hal ini, laboratorium yang menggunakan indikator ini harus membuang limbahnya sesuai dengan peraturan yang berlaku di masing-masing negara.

Referensi

1. Pizzani P, Godoy S, León M, Rueda E, Castañeda M, Arias A. Pengaruh peningkatan konsentrasi Phytic Phosphorus pada aktivitas enzim phytase dan alkaline phosphatase di epitel usus domba muda. Rev. Cient. (Maracaibo). 2008.18 (1): 59-64. Tersedia di: scielo.org.
2. "Timolftalein." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 22 Feb 2019, 04:40 UTC. 19 Mei 2019, 22:20, es.wikipedia.org.
3. Shao F, Zhang L, Jiao L, Wang X, Miao L, Li H, Zhou F. Uji Imunosorben Bebas Enzim dari Antigen Spesifik Prostat Diperkuat dengan Melepaskan Molekul Indikator pH yang Terjebak dalam Nanopartikel Silika Mesopori. Anal Kimia 2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
4. Yu Z, Pan J, Zhou HM. Uji spektrofotometri pH kontinu langsung untuk aktivitas arginin kinase. Protein Pept Lett. 2002; 9 (6): 545-52.
5. Scharlau. Lembar Data Keselamatan Thymolphthalein. 2013. Tersedia di: javeriana.edu.co
6. Lembar Data Keselamatan Thymolphthalein. MSDS. Universitas Nasional Heredia, Kosta Rika. Tersedia dalam: Thymolphthalein% 20 (3).
7. "Arginine kinase." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 10 Jul 2018, 13:49 UTC. 20 Mei 2019, 03:58 en.wikipedia.org.