- Pewarna digunakan dalam pewarnaan sederhana
- 6 langkah pewarnaan sederhana
- Langkah 1
- Pengamatan
- Langkah 2
- Pengamatan
- LANGKAH 3
- LANGKAH 4
- Pengamatan
- LANGKAH 5
- Referensi
The tunggal pewarnaan adalah cepat prosedur pewarnaan dan sederhana di mana pewarna tunggal digunakan, sehingga disebut sederhana. Ini terutama digunakan untuk menentukan morfologi dan organisasi sel yang ada dalam sampel.
Sel secara alami tidak berwarna, jadi penting untuk membuatnya terlihat ketika dilihat di bawah mikroskop.
Sel pipi manusia diwarnai dengan pewarnaan biru metilen sederhana.
Penting untuk digarisbawahi bahwa pewarna yang digunakan pada pewarnaan sederhana harus berbahan dasar dengan muatan positif (kationik), sehingga dapat secara spontan mengikat dinding sel dan sitoplasma.
Struktur seluler ini bermuatan negatif. Inilah sebabnya mengapa pewarna bermuatan positif tertarik ke sel dan mengikatnya secara spontan. Dengan demikian, semua sel yang ada dalam sampel dengan cepat diwarnai.
Pewarna digunakan dalam pewarnaan sederhana
Ada beberapa noda dasar yang dapat digunakan di laboratorium mikrobiologi. Yang paling banyak digunakan adalah:
- Metilen biru.
- Kristal violet.
- Hijau perunggu.
- Fuchsin dasar.
Semua pewarna ini bekerja dengan baik pada bakteri karena mereka memiliki ion warna bermuatan positif (kationik) (kromofor).
Waktu pewarnaan untuk sebagian besar noda ini relatif singkat. Biasanya berkisar dari 30 detik hingga 2 menit, tergantung pada afinitas pewarna.
Penting untuk diingat bahwa sebelum pewarnaan sampel dengan pewarnaan sederhana, sampel harus diperpanjang dan dipasang ke slide kaca (slide); sampel yang diperpanjang dan diperbaiki disebut smear.
6 langkah pewarnaan sederhana
Langkah 1
Letakkan slide di rak pewarnaan dan oleskan pewarna yang diinginkan. Biarkan waktu yang sesuai bertindak.
Biasanya pewarnaan sederhana membutuhkan waktu beberapa detik hingga beberapa menit, tergantung pada noda yang digunakan.
Pengamatan
Pada langkah ini, penting untuk tidak melebihi waktu yang disarankan untuk pewarna yang digunakan, karena kristal dapat terbentuk pada lembaran, menghasilkan apa yang dikenal sebagai "artefak" yang mengubah morfologi sel.
Langkah 2
Cuci bersih noda dari slide dengan air suling dari botol, atau juga air keran yang mengalir perlahan, sampai limpasan menjadi jernih. Ini biasanya membutuhkan waktu 5-10 detik.
Pengamatan
Jangan mengaplikasikan aliran air langsung pada noda, untuk menghindari kekuatan yang sama merusak sampel.
Jika Anda tidak memiliki air suling, Anda dapat menggunakan air ledeng tanpa masalah karena tidak akan mempengaruhi hasil pewarnaan.
LANGKAH 3
Tepuk slide dengan handuk kertas penyerap dalam satu arah dan tanpa menggosok. Pastikan bagian bawah slide bersih.
LANGKAH 4
Amati noda noda di bawah mikroskop. Mulailah dengan tujuan terjauh untuk menemukan dengan tepat area yang ingin Anda amati secara lebih rinci. Ubah tujuan untuk semakin dekat dengan sampel.
Pengamatan
Untuk penggunaan obyektif dengan perbesaran lebih tinggi (biasanya 100X), minyak imersi harus digunakan, karena ini membantu cahaya menembus lebih baik dan gambar tampak lebih tajam. Tidak perlu menggunakan penutup mata.
LANGKAH 5
Terakhir, buang semua sampel dalam wadah yang sesuai yang berlabel "biohazard" dengan benar.
Referensi
- (2001). Aplikasi Mikrobiologi: Laboratory Manual in General Microbiology ( edisi ke- 8 ). Perusahaan McGraw-Hill.
- Harisha, S. (2006). Pengantar Bioteknologi Praktis (1 st ). Media Firewall.
- Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Pewarnaan awal bakteri: Pewarnaan sederhana. Protokol Saat Ini dalam Mikrobiologi, (SUPPL. 15), 1–5.
- Pommerville, J. (2013). Laboratorium Dasar-dasar Mikrobiologi Alcamo (10 th ). Jones & Bartlett Belajar.
- Prescott, H. (2002). Latihan Laboratorium dalam Mikrobiologi (5 th ). Perusahaan McGraw-Hill.
- Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Prinsip Mikrobiologi (1 st ). Pendidikan Tata McGraw-Hill.