STUART MEDIUM: PONDASI, PERSIAPAN DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2025

The media Stuart adalah agar semipadat atau kaldu tanpa nutrisi, digunakan untuk pengangkutan sampel biologis. Tujuannya adalah untuk menjaga agar galur yang ada dalam sampel tetap hidup untuk waktu tertentu, tetapi tanpa meningkatkan populasi mikroba.

Itu dibuat oleh Moffet, Young, dan Stuart pada tahun 1948 dan kemudian dimodifikasi oleh Toshach dan Patsula. Ini terdiri dari natrium gliserofosfat, natrium tioglikolat, kalsium klorida dan agar-agar. Yang terakhir hadir dalam media semi-padat dan tidak ada dalam cairan. Beberapa laboratorium menambahkan biru metilen ke dalamnya.

Culturette dengan transportasi Stuart. Sumber: Oleh: CDC / Dr. Gilda Jones, Sumber: Perpustakaan Gambar Kesehatan Masyarakat

Mereka umumnya digunakan jika tidak mungkin untuk segera menabur sampel. Dalam hal ini sampel ditempatkan pada media transpor, sementara itu dipindahkan ke laboratorium yang akan diolah kultur.

Dengan cara ini, dijamin mikroorganisme yang ada tetap hidup sampai diinokulasi di media kultur yang sesuai.

Awalnya, penggunaannya dimaksudkan untuk mengangkut sampel uretra atau vagina di mana dicurigai adanya Neisseria gonorrhoeae. Belakangan, mereka sadar bahwa kegunaannya bisa lebih luas lagi.

Media Stuart ternyata sangat efisien dalam pelestarian mikroorganisme labil dan rewel seperti Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, dan lain-lain. Selain mikroorganisme tidak mengganggu lainnya seperti Enterobacteria.

Media Stuart pada dasarnya mencegah pengeringan sampel, menjaga keseimbangan osmotik, dan menjaga mikroorganisme pada pH ideal. Di sisi lain, secara strategis media ini tidak mengandung unsur hara, sehingga mencegah mikroorganisme berkembang biak.

Di pasaran terdapat alat pengangkut sampel khusus yang berisi alat pengangkut ini atau alat pengangkut lainnya, yang disebut kultur. Mereka juga bisa disiapkan di laboratorium.

Dasar

Tujuan dari moda transportasi Stuart adalah untuk menjaga agar sampel sedekat mungkin dengan kondisi aslinya sampai diproses.

Sodium gliserofosfat dan kalsium klorida merupakan sistem penyangga yang bekerja dengan cara menjaga pH dan osmolaritas.

Sementara itu, natrium tioglikolat bertindak sebagai zat pereduksi dan jika mengandung agar, ia memberikan konsistensi semipadat, untuk menunda oksigenasi medium. Akhirnya, biru metilen adalah indikator oksidasi, yaitu mendeteksi adanya oksigen.

Media semi-padat dengan indikator redoks sangat ideal untuk mengangkut sampel yang dicurigai terdapat bakteri anaerob.

Karakteristik alat transportasi

Media Stuart, seperti semua alat transportasi, memenuhi karakteristik tertentu, termasuk:

-Menjaga strain mikroba yang ada tanpa berkembang biak.

-Tidak mengandung nutrisi; Senyawanya ditujukan untuk menjaga sampel tetap terhidrasi, di bawah kondisi pH dan osmolaritas yang memadai.

-Menghambat autolizat beberapa mikroorganisme halus, seperti Pneumococcus.

-Penggunaannya bersifat sementara, tidak boleh terlalu lama.

Persiapan

Media Stuart semi-solid dengan indikator redoks

Persiapan rumah

Bahan

Natrium gliserofosfat 10 gr

Natrium tioglikolat 1.0 gr

Kalsium klorida 0,1 gr

Metilen biru 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Air suling 1 L

Campur komponen dan panaskan hingga larut sepenuhnya. Tuang ke dalam tabung atau penyeka khusus. Mereka dimasukkan ke dalam autoklaf dan disterilkan pada 121ºC selama 15 menit. Biarkan tabung mendingin dalam posisi vertikal (dalam bentuk balok). Simpan pada suhu kamar.

Persiapan dengan media komersial

Timbang 14,1 g media dalam 1 liter air suling. Panaskan sambil dikocok sampai benar-benar larut, bisa direbus. Sisa dari prosedur seperti yang telah dijelaskan.

Media dehidrasi berwarna krem ​​dan yang disiapkan harus berwarna biru pada permukaannya. Ini karena adanya biru metilen.

PH media harus disesuaikan menjadi 7,4 ± 0,2

Liquid Modified Stuart Medium (buatan sendiri)

Bahan

Natrium gliserofosfat 10 gr

Natrium tioglikolat 1 gr

Kalsium klorida dihidrat 0,1 gr

Air suling 1000 ml

Ini memiliki bahan yang sama dengan semi-padat, tetapi tidak memiliki agar, atau biru metilen. Dalam hal ini, komponen dicampur tanpa pemanasan dan 0,5 ml didistribusikan dalam tabung 16 x 125 mm dengan tutup ulir.

Ini disterilkan dalam autoclave pada 121 ° C selama 10 menit. Untuk pengambilan sampel, penyeka dakron harus digunakan jika sampel untuk PCR atau rayon jika untuk kultur.

Tabung disimpan pada suhu kamar.

Aplikasi

Secara komersial ada alat pengangkut sampel khusus yang disebut culturette; Alat ini adalah tabung tipis memanjang yang memiliki swab di dalam dan di ujungnya terdapat segmen yang berisi medium Stuart semi-padat atau cair.

Alat dibuka dan sampel diambil dengan swab. Kemudian dimasukkan kembali ke dalam tabung sampai ujung kapas dimasukkan ke dalam media transpor semi-padat; Beberapa membawa spons poliuretan yang diresapi dengan media cair Stuart, dengan mana sampel diawetkan jika tetap basah.

Jika dicurigai terdapat mikroorganisme halus, penyeka kapas dengan arang harus digunakan untuk mengumpulkan sampel.

Sampel yang dapat diambil dengan swab atau swab dan dipindahkan pada media ini adalah eksudat faring, usap rektal dan berbagai sekret, di antaranya: vagina, uretra, luka, okular, otik dan abses.

Selama pemindahan sampel dalam media pengangkut ke laboratorium, media harus berada dalam kondisi lingkungan yang ekstrim (terlalu dingin atau terlalu panas) harus dihindari. Perubahan tekanan atmosfer yang tiba-tiba juga harus dihindari.

Waktu di mana media mampu mempertahankan kelangsungan hidup mikroorganisme akan bergantung pada regangan yang dimaksud. Misalnya, untuk mikroorganisme dari genus Neisserias dan Haemophilus, mereka dapat tetap hidup hingga 24 jam, tetapi strain seperti Salmonella atau Shigella dapat bertahan selama berhari-hari bahkan berminggu-minggu.

Jika diperkirakan bahwa pemrosesan sampel dapat memakan waktu lebih dari 4 hari, lebih disukai untuk membekukan sampel pada -70 ° C.

Identifikasi sampel di sarana transportasi

Sarana transportasi yang disiapkan atau budaya komersial harus memiliki label di mana informasi berikut akan ditempatkan:

Nama depan dan belakang pasien: menghindari kebingungan sampel.

Nomor identifikasi: lebih mudah menyimpan pesanan di tempat kerja.

Sumber pengumpulan sampel: membantu ahli bakteriologi memilih media kultur yang sesuai.

Dokter yang merawat: Terkadang perlu untuk kemungkinan konsultasi.

Tanggal dan waktu pengambilan sampel: perlu untuk penerimaan atau penolakan sampel sesuai dengan waktu yang telah berlalu antara pengambilan sampel dan penerimaan di laboratorium.

Informasi lain yang akan sangat berguna untuk dilampirkan adalah:

Diagnosis dugaan: memandu penambahan media kultur khusus sesuai dengan diagnosis yang dicurigai.

Pengobatan antibiotik: berguna untuk dicantumkan dalam antibiogram.

Semua informasi ini penting untuk memastikan pemrosesan sampel yang tepat.

QA

Untuk mengevaluasi kinerja medium Stuart, strain yang diketahui dapat diinokulasi dan disimpan pada suhu 25 ° C, seperti: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

Dalam semua kasus, mikroorganisme tersebut diharapkan dapat pulih, diawetkan selama 24 jam.

Di sisi lain, strain lain dapat digunakan seperti: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dan Escherichia coli ATCC 11775.

Dalam semua kasus, pemulihan yang melimpah diharapkan hingga 96 jam.

Batasan

Beberapa penelitian memastikan bahwa gliserofosfat yang ada di media Stuart dapat dimetabolisme oleh beberapa koliform, di antara bakteri Gram negatif lainnya, dan oleh karena itu berkembang biak di media ini.

Risiko ini meningkat jika pemrosesan sampel tertunda. Demikian pula, paparan suhu sedang hingga tinggi Stuart selama pengangkutan juga memengaruhi hal ini.

Referensi

1. "Media transportasi (mikrobiologi)." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 13 Apr 2018, 10:36 UTC. 1 Apr 2019. Tersedia di: es.wikipedia.org
2. Laboratorium Microkit: Media Kultur. Stuart Transportation. Tersedia di: Tersedia di: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Alat transportasi Stuart. Tersedia di: lablinsan.cl
4. MDM Ilmiah. Keunggulan memiliki media transpor mikrobiologi Stuart. Tersedia di: mdmcientifica.com
5. Laboratorium Metrix. Stuart. 2017. Tersedia di: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologis. Edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.