- Dasar
- Persiapan
- Menggunakan
- Jenis sampel
- Contoh
- Identifikasi sampel
- Transfer
- Investigasi dilakukan terhadap alat transportasi Cary Blair
- QA
- Referensi
Cary Blair rata - rata adalah agar semipadat, digunakan untuk transportasi dan konservasi sampel biologis yang menyimpan patogen usus, mikroorganisme, dan labil anaerobik. Seperti halnya semua alat angkut, fungsinya untuk menyimpan sampel dalam kondisi optimal hingga diusahakan. Mikroorganisme patogen yang ada, serta mikrobiota yang menyertainya, harus tetap dapat hidup, tetapi tanpa meningkatkan populasinya.
Cary Blair Medium merupakan hasil perubahan formulasi dari Stuart Transport Medium. Modifikasi dilakukan pada tahun 1964 dan terdiri dari penggantian sistem pengatur pH (gliserofosfat) dengan buffer anorganik terfosfat.
A. Budidaya Ikan dengan Medium Cary Blair B. Kolektor Tinja dengan Medium Cary Blair. Sumber: A. Video Meganhow, memperoleh kultur luka 2011 youtube.com B. Pengguna: Mattes
Reformulasi diperlukan karena penciptanya menyadari bahwa gliserofosfat setelah waktu tertentu dapat dimetabolisme oleh beberapa bakteri saprofit. Perbanyakan ini tumpang tindih dengan patogen yang ada.
Perubahan lain adalah penghapusan biru metilen, serta penyesuaian kembali pH menuju alkalinitas (pH 8,4). Semua perubahan ini meningkatkan efisiensi alat transportasi.
Awalnya media Cary Blair digunakan untuk pemeliharaan patogen usus, seperti Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae dan Campylobacter sp.
Namun, kemanjuran dalam melestarikan kelangsungan hidup patogen yang menuntut dan labil, seperti: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae dan beberapa anaerob, kemudian telah terlihat.
Dasar
Medium Cary Blair mengandung natrium klorida, natrium tioglikolat, disodium fosfat, kalsium klorida, dan agar.
Natrium klorida menjaga keseimbangan osmotik medium, disodium fosfat dan kalsium klorida menyeimbangkan pH. Untuk bagiannya, natrium tioglikolat mempertahankan potensi reduksi oksidasi yang rendah, sedangkan sebagian kecil agar memberikan konsistensi semi-padat.
Media Cary Blair tidak mengandung zat gizi, karena fungsi media transpor adalah menyimpan sampel tanpa mengalami perubahan kadar air dan mikroba; yaitu, menghindari dehidrasi sampel sambil mempertahankan kelangsungan hidup dan jumlah mikroorganisme yang ada.
Terakhir, pH yang sedikit basa mencegah kematian mikroorganisme oleh keasaman, terutama Vibrios yang sangat sensitif terhadap asam.
Persiapan
Medium Cary Blair tersedia secara komersial sebagai perangkat khusus yang siap digunakan. Sistem transportasi dilindungi oleh kantong Peel Pack plastik. Di dalamnya berisi swab untuk mengumpulkan sampel dan tabung wadah untuk media semi-padat Cary Blair.
Juga di pasaran ada rumah komersial yang memasok media dehidrasi untuk persiapannya di laboratorium.
Untuk melakukan ini, timbang 13,2 g media dehidrasi dan larutkan dalam satu liter air suling. Panaskan dan kocok sediaan hingga benar-benar larut. Distribusikan media dalam tabung reaksi tertutup sekrup (Bakelite).
Kukus tabung selama 15 menit. Biarkan dingin dan simpan pada suhu kamar sampai digunakan.
Medium Cary Blair yang tidak diinokulasi dapat disimpan secara optimal hingga 18 bulan pada suhu ruang.
PH media harus diatur menjadi 8,4 ± 0,2. Warna media yang disiapkan adalah krem, dengan opalescence tertentu.
Menggunakan
Jenis sampel
Cary Blair Medium digunakan saat sampel tinja, usap rektal, dan usap vagina tidak dapat segera diproses.
Jika tidak ada sarana pengangkut yang tersedia, sampel dapat disimpan pada -70 ° C.
Contoh
Usap diresapi dengan sampel dan dimasukkan ke dalam media Cary Blair, tanpa mencapai dasar.
Identifikasi sampel
Media Cary Blair harus memiliki label tempat data dasar ditempatkan, seperti: nama depan dan belakang pasien, nomor identifikasi sampel, sumber pengambilan sampel, dokter yang merawat, tanggal dan waktu pengambilan. sampel, diagnosis dugaan, pengobatan antibiotik.
Transfer
Tertutup rapat dan diangkut pada suhu kamar untuk sampel tinja. Sedangkan untuk sampel vagina yang mencari mikroorganisme anaerobik, disarankan untuk mengangkut sampel pada suhu 4 ° C.
Dalam semua kasus, waktu transfer yang disarankan adalah 4-6 jam, dengan maksimum 24 jam.
Jika dicurigai adanya Campylobacter jejuni dalam sampel tinja dan tidak dapat diproses dalam waktu 24 jam, sebaiknya disimpan dalam media Cary Blair pada suhu 4 ° C.
Investigasi dilakukan terhadap alat transportasi Cary Blair
Beberapa penelitian telah menunjukkan bahwa medium Cary Blair dapat tetap bertahan terhadap mikroorganisme enteropatogen dari genus Shigella dan Salmonella hingga 49 hari setelah pengambilan sampel.
Sementara itu, Vibrio cholerae, patogen usus penting lainnya, mampu bertahan selama 22 hari, sedangkan Yersinia pestis (agen penyebab penyakit pes dan pneumonia) dapat pulih setelah 75 hari.
Namun, terlepas dari daya tahan yang ditunjukkan dalam hal pemulihan mikroorganisme ini, disarankan agar sampel yang diambil diangkut dalam medium Cary Blair ke laboratorium secepat mungkin.
Begitu pula sampel yang sudah sampai di laboratorium harus segera disemai di media kultur masing-masing.
Di sisi lain, media Cary Blair selain berguna untuk pengangkutan mikroorganisme fakultatif juga direkomendasikan untuk sampel yang mengandung patogen anaerobik.
Dalam pengertian ini, DeMarco dkk. Pada tahun 2017 melakukan penelitian berjudul: Survival of vaginal microorganisms in three commercial transport system.
Mereka mendemonstrasikan bahwa Media Transportasi Cary Blair adalah media transportasi terbaik untuk pengawetan dan pemulihan mikroorganisme anaerobik vagina. Demikian juga, mereka menunjukkan bahwa laju pemulihan tertinggi dicapai ketika suhu transfer 4 ° C.
Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa suhu pengangkutan untuk usap vagina (mikroorganisme anaerobik) harus berada pada 4 ° C. Sedangkan untuk sampel feses yang mencari mikroorganisme fakultatif, suhu yang ideal adalah suhu kamar.
QA
Untuk mengevaluasi pengendalian kualitas media transpor Cary Blair, strain yang dikenal sebagai Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae dan Campylobacter sp.
Media diinokulasi dengan strain yang dipilih dan disimpan pada suhu kamar selama 24 jam. Mereka kemudian disemai di media kultur terkait. Dalam semua kasus, pemulihan mikroorganisme yang dimaksud diharapkan secara memuaskan.
Referensi
- DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, dkk. Kelangsungan hidup mikroorganisme vagina dalam tiga sistem transportasi yang tersedia secara komersial. Anaerobe. 2017; 45: 44–49.
- Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A.Perbandingan media pengawet untuk penyimpanan sampel tinja. J Clin Microbiol. sembilan belas sembilan puluh lima; 33 (8): 2176–2178.
- Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Perbandingan media pengawetan dan kondisi pembekuan untuk penyimpanan spesimen feses. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologis. Edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
- Laboratorium Conda Pronadisa. Setengah Cary Blair. Tersedia di: condalab.com
- Laboratorium Metrix. Cary Blair. Tersedia di: metrixlab.mx