KULTUR DARAH: UNTUK APA, ALASAN, PROSEDUR, HASIL - BIOLOGI - 2024

The kultur darah adalah tes bakteriologis yang berusaha untuk mendeteksi keberadaan mikroorganisme di dalam darah. Darah pada dasarnya adalah cairan steril dan karenanya harus disimpan dalam kondisi fisiologis, sehingga keberadaan bakteri atau jamur dalam darah selalu bersifat patologis.

Ketika bakteri atau jamur berada di dalam darah, tetapi perbanyakannya tidak melebihi eliminasi mikroorganisme oleh sistem kekebalan, itu disebut bakteremia (untuk bakteri) atau fungemia (untuk jamur); Namun bila jumlah mikroorganisme meningkat tidak terkendali maka disebut septicemia.

Botol kultur darah (kuning: aerobiosis pediatrik, hijau: aerobiosis dewasa, dan merah: anaerobiosis dewasa). Sumber: foto diambil oleh penulis MSc Marielsa Gil.

Bakteremia, fungemia dan septikemia membahayakan nyawa penderita sehingga harus segera ditangani. Itu sebabnya, bila ada kecurigaan adanya infeksi pada darah, dokter meminta pemeriksaan kultur darah.

Analisis bakteriologis ini memungkinkan untuk mengetahui ada tidaknya infeksi dalam darah dan mikroorganisme mana yang terlibat. Selain itu, jika positif, dilakukan uji sensitivitas untuk mengetahui antibiotik atau antijamur mana yang dapat digunakan dalam pengobatan.

Sebaliknya, jika kultur darah negatif pada 24 jam inkubasi, sebaiknya tidak dibuang sampai negatif mencapai 240 jam. Ini memastikan bahwa tidak ada mikroorganisme yang tumbuh lambat.

Agar biakan darah dapat diandalkan, tindakan aseptik yang ekstrem harus dilakukan saat mengambil sampel, dan untuk meningkatkan keandalan dan kepekaan tes, paling tidak dua sampel harus diambil selama atau mendekati puncak demam.

Untuk apa ini?

Darah adalah cairan steril dan bila ditemukan mikroorganisme di dalamnya 100% patologis. Situasi ini menunjukkan gambaran klinis yang sangat peka yang membahayakan kehidupan pasien.

Kultur darah adalah tes bakteriologis penting yang mendeteksi keberadaan mikroorganisme dalam aliran darah.

Mikroorganisme dapat mencapai darah melalui jalur yang berbeda, yang dapat berupa infeksi ekstravaskular seperti: pneumonia, infeksi intra-abdominal, pielonefritis, infeksi serius pada kulit, jaringan lunak atau artritis, antara lain.

Atau bisa juga melalui infus, misalnya kontaminasi kateter intravena atau arteri, endokarditis, kecanduan obat intravena, pemberian obat atau larutan yang terkontaminasi, dll.

Mendeteksi dan mengobati agen penyebab sepsis pada waktunya sangat penting untuk memastikan kelangsungan hidup pasien.

Dalam hal ini, dokter harus menunjukkan realisasi kultur darah ketika ia mengamati tanda dan gejala yang menunjukkan septikemia, seperti: demam (lebih dari 38 ° C) tanpa fokus infeksi yang jelas atau, sebaliknya, hipotermia (<de 36 ° C).

Tanda-tanda lain mungkin: menggigil, peningkatan jumlah sel darah putih (> 10.000 sel / mm ³ ) atau penurunan sel polimorfonuklear yang signifikan (<1.000 PMN / mm ³ ). Serta kerusakan multiorgan atau hilangnya vitalitas secara tiba-tiba, antara lain tanda peringatan.

Bakteremia bisa konstan, sementara, atau intermiten. Ini penting untuk pengambilan sampel, karena perlu diambil ketika ada kemungkinan lebih besar untuk menemukan mikroorganisme yang bersirkulasi.

Oleh karena itu disarankan untuk mengambil minimal 2 sampel di tempat yang berbeda. Selain itu, yang ideal adalah sampel diambil pada puncak demam atau ketika pasien mengalami menggigil, hipotermia ekstrem, berkeringat atau takikardia.

Namun, agar kultur darah menjadi alat yang benar-benar berguna, sampel harus diambil dengan sangat hati-hati. Manipulasi yang buruk atau asepsis yang buruk pada saat pengambilan sampel dapat membuat pengujian tidak valid, sehingga menghasilkan hasil positif palsu.

Dasar

Penelitian terdiri dari pengambilan dua atau tiga sampel darah secara aseptik dan menempatkannya dalam botol khusus.

Alat khusus untuk kultur sampel darah disebut botol kultur darah. Ini diklasifikasikan menjadi:

Sesuai dengan usia penderita

-Penggunaan pediatrik

-Untuk orang dewasa.

Menurut jenis mikroorganisme

-Flask untuk mikroorganisme aerob (bakteri aerob, bakteri fakultatif, dan jamur).

-Botol kultur darah untuk mikroorganisme anaerobik (bakteri anaerob ketat).

Beberapa mengandung media kultur cair dan beberapa mengandung media kultur padat dan cair pada saat yang bersamaan. Mereka juga ada dengan partikel karbon aktif.

Proses

Rekomendasi untuk pengambilan sampel

- Sampel akan diambil oleh personel yang sangat terlatih dan terlatih di bidang mikrobiologi.

- Asepsis atau pembersihan menyeluruh dari lokasi pengambilan sampel tidak diragukan lagi merupakan langkah terpenting.

- Seperti semua pengambilan sampel, petugas kesehatan harus sepenuhnya mematuhi tindakan keamanan hayati selama proses (antara lain penggunaan sarung tangan, gaun pelindung, kacamata).

- Berhati-hatilah agar semua alat yang diperlukan untuk pengambilan sampel tersedia.

- Beri label botol dengan nama lengkap pasien, tanggal, nomor rekam medis, waktu pengambilan sampel, dan nomor urut laboratorium.

-Idealnya adalah mengambil sampel sebelum pasien memulai terapi antimikroba. Ini hanya diindikasikan jika diduga tidak berfungsinya pengobatan yang sedang berlangsung. Dalam hal ini, sampel harus diambil sebelum penggantian obat, menggunakan botol kultur darah dengan inhibitor antibiotik (partikel karbon aktif).

- Minimal 2 sampel harus diambil di lokasi anatomi yang berbeda, seperti lengan kanan dan lengan kiri. Pada dugaan endokarditis, direkomendasikan 3 sampel. Dua botol akan dimasukkan dalam setiap sampel (satu untuk aerobiosis dan satu untuk anaerobiosis).

Kuantitas sampel

Jumlah sampel bervariasi sesuai dengan usia pasien, tetapi rasio 1: 5 hingga 1:10 harus selalu dipertahankan sehubungan dengan pengenceran kaldu darah / kultur.

Pada bayi baru lahir, jumlah sampel yang dianjurkan adalah 1 ml darah per vial. Botol pediatrik digunakan.

Untuk bayi antara satu bulan dan satu tahun, dapat ditingkatkan menjadi 1,5 ml darah per botol. Botol pediatrik digunakan.

Pada anak di atas 2 tahun jumlah sampel yang sesuai adalah 2,5 ml darah per vial. Botol pediatrik digunakan.

Sejak remaja dapat ditingkatkan volume darahnya antara 5 - 10 ml per botol. Botol dewasa digunakan.

Terakhir, pada tahap dewasa, jumlah yang diperlukan adalah 8-10 ml per botol. Botol dewasa digunakan.

Contoh

- Sampel darah bisa vena atau arteri. Namun, darah arteri diambil hanya jika pengambilan sampel vena tidak memungkinkan.

- Tidak disarankan untuk mengambil sampel dari kateter vena sentral kecuali:

1. Tidak mungkin mengambil sampel secara perifer (vena atau arteri).
2. Penderita berisiko mengalami perdarahan.
3. Bila dokter mencurigai bakteremia akibat kontaminasi kateter vena sentral.
4. Saat demam muncul kembali setelah demam berhenti selama 4 sampai 5 hari, terlepas dari apakah pasien sedang menjalani pengobatan antimikroba atau tidak.

Asepsis sebelum pengambilan sampel

- Pilih situs anatomi untuk pengambilan sampel. Umumnya, vena dengan kaliber terbaik dipilih (vena basilika atau vena cephalic).

- Menurut Pusat Pengendalian Penyakit (CDC) di Atlanta (AS), operator harus mencuci tangan dengan 2% klorheksidin atau 10% povidon iodin sebelum pengambilan sampel, selain memakai sarung tangan.

-Palpasi dan cari vena yang akan digunakan.

-Bersihkan area tusukan dengan cara berputar, lakukan gerakan dari tengah ke luar menggunakan sabun klorheksidin atau sabun antiseptik. Bilas dengan larutan garam steril.

Selanjutnya, gunakan antiseptik dan biarkan bekerja. Contoh chlorhexidine gluconate 0.5% selama 1 menit atau povidone iodine 10% selama 2 menit. Untuk yang terakhir, tanyakan dulu apakah pasien alergi terhadap yodium. Jika Anda alergi, Anda bisa mengganti alkohol 70%.

Ekstraksi sampel

- Pasang tourniquet untuk memperburuk aliran darah dan menumbuhkan vena.

- Jangan menyentuh lagi tempat tusukan dengan jari Anda. Jika ini benar-benar diperlukan, jari harus dicuci dengan cara yang sama seperti area tusukan.

-Masukkan jarum suntik atau kulit kepala ke pembuluh darah dan ekstrak jumlah darah yang diperlukan.

-Jangan memakai kapas atau kain kasa pada jarum saat melepasnya jika tidak steril.

-Lepaskan segel pengaman dari botol dengan sangat hati-hati dan tanpa menyentuh tutupnya. Beberapa penulis merekomendasikan untuk melakukan desinfeksi tutup sebelum menginokulasi sampel.

- Bagikan darah dalam jumlah yang sesuai di dalam vial. Jika sampel diambil dengan injektor, jumlah yang diperlukan dituangkan terlebih dahulu ke dalam labu anaerobik dan kemudian ke dalam labu aerobik. Jika pengambilannya dilakukan dengan kulit kepala (kupu-kupu) maka dituang dengan cara sebaliknya.

- Campur botol kultur darah secara perlahan dengan inversi.

- Ganti sarung tangan dan ulangi langkah sebelumnya untuk pengambilan sampel kedua.

-Jika sampel kedua diambil dari lokasi yang berbeda, maka dapat dilakukan segera, tetapi jika sampel tersebut berasal dari situs yang sama, Anda harus menunggu 30 hingga 90 menit antara satu sampel dengan sampel lainnya.

- Sampel harus segera dibawa ke laboratorium, jika tidak memungkinkan harus dibiarkan pada suhu ruangan maksimal 18 jam.

Budaya

Setelah di laboratorium, labu diinkubasi pada suhu 37 ° C di bawah kondisi masing-masing labu, yaitu aerobiosis dan anaerobiosis.

Di bawah metode manual, dering harus dimulai pada 24 jam inkubasi dan kemudian dering antar-hari. Cincin dilakukan sebagai berikut: pertama tutup botol didisinfeksi dan jarum injektor steril dimasukkan. Cairan diekstraksi dari labu dan ditaburkan pada agar darah dan agar coklat.

Jika ada pertumbuhan, dilakukan Gram, subkultur di media tertentu, uji biokimia dan antibiogram.

Dalam metode otomatis, peralatan Bact / Alert membunyikan alarm ketika mendeteksi bahwa vial positif. Dengan cara yang sama, harus disadap pada agar darah dan agar coklat.

Metode lain yang dilakukan adalah dengan menganalisa labu setelah 6 jam inkubasi melalui spektrometri massa. Metode ini telah membantu meningkatkan kepekaan dan kecepatan diagnosis.

Hasil

Selama botol kultur darah negatif, laporan awal antara dapat diberikan kepada dokter yang merawat. Laporan tersebut menunjukkan bahwa itu negatif pada jam-jam inkubasi. Misalnya, jika negatif hingga hari keempat, maka akan dilaporkan sebagai berikut:

Hasil pendahuluan: kultur negatif pada 96 jam inkubasi.

Catatan: belajar berlanjut selama 240 jam.

Jika kultur darah positif, dokter yang merawat segera diberitahu dan laporan dikirim dengan setidaknya gram koloni. Contoh:

Hasil awal: dalam kultur positif pada 48 jam inkubasi, basil gram negatif dan oksidase negatif diamati. Identifikasi dan pengujian sensitivitas sedang dalam proses.

Informasi ini memandu dokter yang merawat untuk memulai terapi empiris terhadap kemungkinan mikroorganisme, sambil menunggu hasil akhir laboratorium.

Setelah menyelesaikan studi bakteriologis, yaitu mikroorganisme telah diidentifikasi dan antibiotikogram tersedia, laporan akhir harus dikirim secepat mungkin.

Perhatian khusus harus diberikan jika organisme target adalah Neisseria gonorrhoeae atau Neisseria meningitidis, karena bakteri ini dihambat dengan adanya sodium polyanethosulfonate (SPS) konsentrasi tinggi.

Itulah mengapa senyawa ini tidak boleh melebihi 0,025% dalam botol kultur darah.

Sebaliknya, jika sampel kultur darah pertama kali diambil di tabung Vacutainer, tabung ini memiliki konsentrasi SPS yang beracun bagi meningokokus dan gonokokus, sehingga darah harus dipindahkan dalam waktu 1 jam ke sistem kultur kaldu.

Bagaimana mengetahui apakah kultur darah positif atau kontaminasi

Kultur darah dianggap terkontaminasi bila terdapat pertumbuhan hanya pada satu vial kultur darah dari total yang diambil. Dan kecurigaan kontaminasi meningkat jika mikroorganisme yang diisolasi adalah mikrobiota kulit biasa: contoh: Staphylococcus koagulase negatif, Propionibacterium spp, antara lain.

Namun, pada pasien immunocompromised, tidak ada mikroorganisme yang boleh diabaikan, tetapi dalam hal ini mikroorganisme akan muncul dalam beberapa sampel.

Sebaliknya, jika kepekaan terhadap antibiotik dari mikroorganisme yang sama yang diisolasi dalam dua sampel berbeda adalah sama, berarti infeksi itu nyata.

Karakteristik lain adalah jumlah bakteri, karena kultur darah yang terkontaminasi tumbuh lambat, sedangkan infeksi nyata pada pasien yang tidak diobati umumnya positif pada 14 jam inkubasi ketika mikroorganisme tidak mengganggu.

Di sisi lain, pada pasien yang diobati dengan antimikroba, mikroorganisme yang terlibat mungkin membutuhkan waktu untuk tumbuh karena bebannya sangat rendah.

Munculnya lebih dari satu mikroorganisme mungkin menunjukkan kontaminasi, tetapi jika hasil yang sama diulangi dalam beberapa bidikan dari tempat berbeda, maka itu nyata.

Referensi

1. "Budaya darah." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 3 Jul 2019, 17:28 UTC. 14 Jul 2019, 19:05 en.wikipedia.org
2. Hervé B. Teknologi baru dalam diagnosis mikrobiologi: otomatisasi dan beberapa aplikasi dalam identifikasi mikroba dan studi kerentanan. Pdt Med. Clin. Hitungan. 2015; 26 (6) 753-763. Tersedia di: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. Bab 20: Sepsis dan risiko penyakit kardiovaskular. Kesehatan jantung. hlm 187-194. Tersedia di: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Kultur darah: Apa yang telah mereka katakan dan apa yang Anda lakukan? Sakit gumpal. 2012; 11 (26): 146-163. Tersedia di: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Probabilitas keberhasilan memperoleh kultur darah positif. Med. Interna Mex. 2017; 33 (1): 28-40. Tersedia di: scielo.org