TES SILANG: UNTUK APA MEREKA, TEKNIK, DASAR PEMIKIRAN, FASE - OBAT

The crossmatch sejumlah penelitian laboratorium dilakukan untuk menentukan apakah produk darah dari donor (terutama seluruh darah dan dikemas globular) yang kompatibel dengan darah penerima.

Ini adalah tes pelengkap tambahan untuk kompatibilitas ABO dan faktor Rh. Alasan crossmatching adalah bahwa terkadang dua individu (donor-penerima) mungkin memiliki kelompok ABO dan Rh yang sama tetapi tetap saja darah mereka tidak sesuai.

Sumber: unsplash.com

Ketidakcocokan tersebut disebabkan oleh adanya antibodi terhadap serangkaian protein sel darah merah yang dikenal sebagai antigen minor. Antigen ini tidak diuji secara rutin seperti untuk golongan darah (ABO) dan faktor Rh.

Ini karena antigen minor jauh lebih jarang dan memiliki ekspresi variabel pada setiap individu, oleh karena itu hampir tidak mungkin untuk mengelompokkan mereka ke dalam kategori seperti yang dilakukan dengan kelompok dan faktor Rh.

Sebagai gantinya, sel darah merah donor dicampur dengan serum pasien (major match test) dan sel darah merah pasien dengan serum donor (minor match test) untuk mendeteksi adanya reaksi antigen-antibodi.

Jika terdapat antibodi terhadap antigen minor, baik dalam serum pasien atau donor, tes tersebut dikatakan positif, sehingga dalam banyak kasus unit darah tertentu tidak dapat ditransfusikan.

Grup ABO

Untuk memahami sepenuhnya tentang reaksi silang, Anda harus terlebih dahulu mengetahui dasar-dasar golongan darah.

Dalam pengertian ini, yang terpenting adalah mengetahui bahwa darah dapat diklasifikasikan menjadi empat kelompok: A, B, AB dan O.

Masing-masing kelompok ini mengekspresikan protein (antigen) tertentu pada permukaan sel darah merah, yang diidentifikasi sebagai unsur asing oleh antibodi reseptor potensial dari kelompok berbeda.

Hal yang paling mencolok tentang reaksi antigen-antibodi dalam pencocokan darah adalah tidak ada paparan antigen sebelumnya yang diperlukan agar antibodi ada. Ini dikenal sebagai antibodi alami.

Antibodi alami

Umumnya, agar antibodi ada di dalam tubuh individu, sel darah putih individu tersebut harus sebelumnya telah terpapar antigen.

Ini berarti bahwa pada kontak pertama antara antigen asing dan organisme, tidak ada antibodi, karena antibodi ini dihasilkan kemudian, setelah kontak awal. Oleh karena itu, tidak mungkin sistem kekebalan memiliki antibodi untuk melawan, misalnya virus tertentu, jika belum pernah terpajan sebelumnya.

Satu-satunya pengecualian di atas adalah antigen anti-AB. Dalam kasus ini, orang tersebut memiliki antibodi terhadap antigen yang tidak dimiliki oleh sel darah merahnya, meskipun mereka tidak pernah bersentuhan dengan sel darah merah orang lain. Ini dikenal sebagai antibodi alami.

Antigen dan antibodi terkait dengan golongan darah

Golongan darah ditentukan dalam kasus sistem ABO dengan adanya antigen spesifik (A atau B) pada membran sel darah merah dan, sebaliknya, antibodi melawan antigen yang tidak ada pada membran eritrosit.

Jadi, seseorang dengan golongan darah A mengekspresikan antigen A di permukaan sel darah merahnya, sedangkan antibodi anti-B di dalam serumnya.

Sebaliknya, pada pasien grup B ditemukan antigen B sedangkan antibodi adalah anti-A.

Namun, pasien dengan darah AB memiliki antigen A dan B. Oleh karena itu, tidak terdapat antibodi karena hal tersebut akan menghancurkan sel darah merah orang tersebut.

Sebaliknya terjadi pada kelompok O, di mana membran eritrosit tidak menunjukkan salah satu dari dua antigen (baik A maupun B), sedangkan di dalam serum terdapat antibodi anti-A dan anti-B.

Ketidakcocokan grup ABO

Dari penjelasan di atas, kompatibilitas golongan darah ABO dapat dengan mudah disimpulkan, karena dengan mengetahui antigen membran eritrosit secara otomatis mengetahui antibodi dalam serum. Yang seperti itu:

- Darah A kompatibel dengan grup A dan grup O.

- Golongan darah B kompatibel dengan darah B dan O.

- Orang dengan golongan O hanya dapat menerima darah O (karena mereka memiliki antibodi anti-A dan anti-B), meskipun darah mereka diterima oleh semua golongan lain tanpa masalah karena kekurangan antigen.

- Akhirnya. mereka yang bergolongan darah AB dapat menerima darah dari semua golongan lain (A, B, O dan tentu saja AB), karena mereka tidak memiliki antibodi terhadap antigen mana pun. Namun, hanya orang dalam kelompok AB yang dapat menerima darah AB, karena semua kelompok lain memiliki antibodi yang akan menghancurkan sel darah merah ini.

Antigen minor

Seperti gugus ABO, serangkaian protein dapat ditemukan di permukaan eritrosit yang berfungsi sebagai antigen dengan cara yang sama seperti antigen gugus ABO.

Namun, antigen ini tidak ada pada semua individu. Kombinasi mereka heterogen dan penetrasi (tingkat ekspresi protein) bervariasi, oleh karena itu klasifikasi menjadi kelompok seperti yang ada untuk ABO dan Rh tidak mungkin. Oleh karena itu, ia mendapatkan namanya dari "antigen minor", juga dikenal sebagai "antigen insiden rendah".

Meskipun jarang, mungkin ada antibodi alami yang melawan antigen minor. Diantaranya yang paling umum adalah Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb dan Kidd. Semuanya bertanggung jawab atas reaksi hemolitik dan pasca transfusi yang sangat serius.

Selain itu, mungkin ada kasus sensitisasi terhadap antigen minor melalui kontak sebelumnya, baik dengan protein antigenik tersebut karena transfusi sebelumnya atau karena imunitas silang.

Kekebalan silang

Dikatakan bahwa terdapat kekebalan silang ketika dua antigen dari dua sumber yang berbeda (misalnya sel darah merah dan bakteri) sangat mirip, sehingga antibodi terhadap salah satu protein antigen ini juga bereaksi dengan yang lain karena hampir identik. .

Untuk memahami ini lebih baik, ambil contoh hipotesis sebelumnya (antigen dari sel darah merah dan bakteri). Dalam kedua kasus tidak ada antibodi alami, tetapi jika seseorang terpapar pada bakteri, mereka akan menghasilkan antibodi untuk melawannya.

Antibodi semacam itu nantinya akan bereaksi terhadap sel darah merah jika antigennya sangat mirip dengan bakteri yang memicu pembentukan antibodi.

Jika ini terjadi, sel darah merah dengan protein antigenik tertentu tidak dapat diberikan kepada orang yang memiliki antibodi, karena akan ada penolakan. Di sinilah letak pentingnya reaksi silang.

Untuk apa crossmatching itu?

Karena tidak mungkin mengelompokkan darah individu yang berbeda berdasarkan antigen minor, satu-satunya cara untuk mengetahui apakah ada antibodi terhadap antigen minor sel darah merah orang lain dalam darah seseorang adalah melalui pencocokan silang. .

Dalam kasus di mana terdapat antibodi, reaksi hemolisis atau aglutinasi dipicu, itulah sebabnya disimpulkan bahwa reaksinya positif; artinya, terdapat antibodi terhadap antigen minor (meskipun tidak diketahui secara pasti yang mana). Jika tidak, tesnya negatif.

Dasar

Crossmatch didasarkan pada reaksi antigen-antibodi. Oleh karena itu, dengan mereka dimungkinkan untuk mendeteksi apakah dalam serum penerima terdapat antibodi terhadap antigen sel darah merah donor (atau sebaliknya) yang menginduksi reaksi antigen-antibodi.

Jika tidak ada antibodi, tidak ada reaksi yang terjadi dan tes dilaporkan negatif. Sebaliknya, jika reaksinya positif (terjadi hemolisis atau aglutinasi selama pengujian) dapat disimpulkan bahwa terdapat antibodi.

Dalam hal ini, penting untuk dicatat bahwa mungkin terdapat antibodi yang melawan sel darah merah baik dalam serum donor maupun resipien. Inilah mengapa ada dua jenis reaksi silang.

Jenis reaksi silang

Antibodi melawan eritrosit donor mungkin ada di serum pasien; tetapi hal sebaliknya juga dapat terjadi, yaitu antibodi dalam serum donor terhadap sel darah merah pasien.

Itulah mengapa ada dua jenis crossmatch:

- Pertandingan besar.

- Pertandingan kecil.

Kedua jenis ini dilakukan secara rutin di bank darah sebelum mentransfusikan produk darah, karena jika ada hasil pemeriksaan yang positif, ada risiko tinggi reaksi transfusi yang dapat membahayakan nyawa pasien.

Pertandingan silang besar

Tes ini menilai apakah serum penerima mengandung antibodi terhadap sel darah merah donor.

Jika ini terjadi, produk darah tidak dapat diberikan, karena sejumlah besar antibodi yang ada di plasma pasien akan menghancurkan sel darah merah donor dengan sangat cepat, menghasilkan reaksi bencana di tubuh penerima dalam prosesnya. Reaksi ini sangat parah sehingga bisa mengancam nyawa.

Pertandingan silang kecil

Dalam kasus ini, ditentukan apakah ada antibodi yang melawan sel darah merah penerima dalam serum donor.

Jika demikian, antibodi akan mulai menghancurkan eritrosit penerima. Namun, mengingat jumlah antibodi terbatas, reaksinya menjadi kurang intens; meski masih berbahaya.

Tahapan

Crossmatch mayor dan minor dibagi menjadi tiga fase:

- Saline.

- Thermal atau inkubasi.

- Coombs.

Pada fase pertama sel darah merah dan serum dicampur dalam larutan garam. Selanjutnya, albumin ditambahkan, dan sampel diinkubasi pada suhu 37ºC selama 30 menit hingga akhirnya dilanjutkan dengan fase coombs.

Teknik

Teknik crossmatch relatif mudah, karena melibatkan penambahan sel darah merah donor ke serum pasien (major crossmatch) serta eritrosit penerima ke serum donor (minor crossmatch).

Untuk menginduksi reaksi antigen-antibodi dalam waktu yang relatif singkat, serangkaian langkah standar harus diikuti. Langkah-langkah ini dirangkum dengan cara yang disederhanakan di bawah ini.

Penting untuk dicatat bahwa bagian selanjutnya menjelaskan tes kompatibilitas utama, meskipun langkah-langkahnya sama untuk tes kompatibilitas minor, tetapi pertukaran asal sel darah merah dan serum.

Fase saline

- Tambahkan ke tabung reaksi 2 tetes serum dari penerima (dari donor jika itu adalah crossmatch minor).

- Ambil sample sel darah merah dari donor (dari resipien jika minor crossmatch).

- Cuci dan sentrifugasi sel darah merah.

- Tangguhkan kembali dalam larutan antara 3% dan 5%.

- Teteskan larutan ini ke dalam tabung yang berisi serum penerima.

- Aduk perlahan.

- Centrifuge.

- Baca hasilnya di lampu layar.

Fase termal

- Tambahkan 2 tetes albumin 22% ke dalam tabung tempat fase garam selesai.

- Inkubasi pada suhu 37ºC selama 30 menit.

- Centrifuge selama 15 detik.

- Baca hasilnya di lampu layar.

Fase Coombs

- Ambil sel dari tabung dan cuci dengan larutan garam.

- Singkirkan supernatan.

- Tambahkan dua tetes reagen Coombs.