TES BIOKIMIA: JENIS, UNTUK APA DAN KEPENTINGANNYA - BIOLOGI - 2025

The tes biokimia dalam mikrobiologi adalah seperangkat bahan kimia tes dilakukan untuk mikroorganisme hadir dalam sampel untuk mengidentifikasi mereka ; Mikroorganisme ini biasanya adalah bakteri. Ada banyak tes biokimia yang tersedia untuk ahli mikrobiologi.

Namun, pilihan tes ini didasarkan pada temuan awal, seperti pola pewarnaan Gram dan sifat pertumbuhan, yang memungkinkan bakteri dimasukkan ke dalam kategori tertentu. Tes biokimia terutama didasarkan pada sifat metabolisme setiap jenis bakteri.

Tidak semua bakteri memiliki sifat yang sama, sehingga diteliti apakah mereka memiliki enzim tertentu dengan menambahkan substrat dan menunggu reaksi terjadi. Biasanya penentuan ini diberikan oleh perubahan warna atau pH dalam media kultur.

Kurang dari 15 uji biokimia sering diperlukan untuk identifikasi bakteri yang andal hingga ke tingkat spesies. Melakukan lebih banyak tes biokimia dapat meningkatkan kepercayaan dalam identifikasi.

Sebagian besar tes biokimia ini dilakukan pada serum atau plasma darah. Namun, pemeriksaan ini juga dapat dilakukan pada sekresi biologis lainnya seperti: urin, cairan serebrospinal, cairan pleura, dan feses.

Klasifikasi

Tes biokimia dapat diklasifikasikan menjadi 3 kelompok:

Universal

Ini adalah tes yang dapat dilakukan pada sampel apa pun dan yang memandu ahli mikrobiologi pada tes biokimia berikut yang harus dilakukan untuk mendapatkan identifikasi yang andal.

Contoh

Uji katalase dan oksidase.

Diferensial

Ini adalah tes yang dilakukan untuk mengidentifikasi mikroorganisme yang ada dalam sampel hingga ke tingkat spesies.

Identifikasi dibuat berdasarkan hasil kombinasi tes, karena hasil individu tidak cukup informatif untuk membuat identifikasi.

Contoh

Tes IMViC dan tes pemanfaatan gula.

Spesifik

Mereka adalah tes khusus untuk satu set spesies tertentu atau untuk subtipe spesies. Tes ini umumnya dilakukan untuk mengkonfirmasi atau mengidentifikasi di tingkat subspesies. Tes individu itu sendiri informatif.

Contoh

Tes γ-Glutamyl aminopeptidase.

Jenis tes biokimia

Uji katalase

Uji katalase merupakan uji untuk mendemonstrasikan keberadaan enzim katalase dengan cara memecah hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Sejumlah kecil bakteri ditambahkan ke setetes hidrogen peroksida (3%) pada kaca objek.

Tes katalase adalah tes sederhana yang digunakan oleh ahli mikrobiologi untuk membantu mengidentifikasi spesies bakteri dan untuk menentukan kemampuan beberapa mikroba untuk memecah hidrogen peroksida dengan menghasilkan enzim katalase.

Jika diamati gelembung oksigen, itu berarti bakteri tersebut memiliki enzim katalase, karena mengkatalisis penguraian hidrogen peroksida menjadi oksigen dan air. Organisme ini kemudian dikatakan sebagai katalase positif (misalnya Staphylococcus aureus).

Uji oksidase

Tes ini digunakan untuk mengidentifikasi mikroorganisme yang mengandung enzim sitokrom oksidase (penting dalam rantai transpor elektron). Biasanya digunakan untuk membedakan antara keluarga Enterobacteriaceae dan Pseudomadaceae.

Sitokrom oksidase mentransfer elektron dari rantai transpor elektron ke oksigen (akseptor elektron terakhir) dan menguranginya menjadi air. Molekul donor dan akseptor elektron buatan disediakan dalam uji oksidase.

Ketika donor elektron dioksidasi oleh aksi sitokrom oksidase, medium berubah menjadi ungu tua dan dianggap sebagai hasil positif. Mikroorganisme Pseudomonas aeruginosa adalah contoh bakteri oksidase positif.

Uji Salted Mannitol Agar (MSA)

Jenis tes ini bersifat selektif dan diferensial. MSA akan memilih organisme yang mampu hidup di lingkungan dengan konsentrasi garam tinggi, seperti spesies Staphylococcus berbeda dengan spesies Streptococcus, yang pertumbuhannya terhambat dalam kondisi ini.

Komponen diferensial dalam pengujian ini adalah gula manitol. Organisme yang mampu memanfaatkan manitol sebagai sumber makanan akan menghasilkan produk samping fermentasi yang bersifat asam sehingga menurunkan pH medium.

Keasaman medium menyebabkan indikator pH, merah fenol, menjadi kuning. Contoh spesies bakteri yang dapat dibedakan dengan metode ini adalah: Staphylococcus aureus (positif karena memfermentasi manitol) dan Staphylococcus epidermidis (negatif karena tidak memfermentasi manitol).

Tes koagulase

Koagulase adalah enzim yang membantu pembekuan plasma darah. Tes ini dilakukan pada spesies Gram positif dan katalase positif untuk mengidentifikasi Staphylococcus aureus (koagulase positif). Faktanya, koagulase adalah faktor virulensi dari spesies bakteri ini.

Pembentukan gumpalan di sekitar infeksi yang disebabkan oleh bakteri ini mungkin melindunginya dari fagositosis. Tes ini sangat berguna ketika Anda ingin membedakan Staphylococcus aureus dari spesies Staphylococcus lain yang koagulase negatif.

Tes urease

Tes ini digunakan untuk mengidentifikasi bakteri yang mampu menghidrolisis urea, menggunakan enzim urease. Biasanya digunakan untuk membedakan genus Proteus dari bakteri enterik lainnya.

Hidrolisis urea menghasilkan amonia sebagai salah satu produknya. Basa lemah ini meningkatkan pH medium di atas 8,4 dan indikator pH (merah fenol) berubah dari kuning menjadi merah muda. Contoh bakteri positif urease adalah Proteus mirabilis.

Untuk apa tes biokimia?

Tes biokimia dalam mikrobiologi digunakan untuk mendiagnosis penyakit yang disebabkan oleh mikroba dan untuk memantau perawatan yang diberikan untuk memerangi mereka. Selain itu, mereka digunakan untuk skrining penyakit menular dan untuk prognosisnya.

Identifikasi biokimia mikroorganisme menawarkan gambaran tentang kemampuan mikroorganisme ini, yang memungkinkan pembedaan strain yang berbeda dari spesies yang sama dengan profil biokimia tertentu.

Perbedaan aktivitas enzim tertentu menginformasikan ekologi, fisiologi atau habitat alami mikroorganisme, yang dalam beberapa kasus dapat dianggap sebagai informasi penting.

Pentingnya

Perbedaan struktur dalam bentuk, ukuran, dan susunan bakteri tidak banyak membantu dalam proses identifikasi, karena banyak jenis bakteri yang memiliki kesamaan bentuk, ukuran, dan susunan.

Untuk alasan ini, identifikasi bakteri pada akhirnya didasarkan pada perbedaan aktivitas biokimianya.

Setiap spesies bakteri memiliki rangkaian aktivitas metabolisme yang berbeda dari semua spesies lainnya. "Sidik jari" biokimia ini adalah properti yang dikendalikan oleh enzim bakteri.

Dengan demikian, tes biokimia penting karena membantu peneliti untuk mengidentifikasi dengan benar patogen yang ada dalam sampel dan, dengan cara ini, dapat merekomendasikan pengobatan yang tepat kepada pasien.

Referensi

1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Clinical Biochemistry (edisi ke-8th). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, PH, & Cowan, ST (1952). Metode biokimia untuk bakteriologi. Jurnal Mikrobiologi Umum, 6 (1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Clinical Biochemistry (edisi ke-5). Ilmu Kesehatan Elsevier.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Practical Handbook of Microbiology (edisi ke-2nd). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Laboratory Methods in Food Microbiology (edisi ke-3rd). Pers Akademik.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Mikrobiologi Praktis. BI Publications Pvt Ltd.