KROMATOGRAM: UNTUK APA DAN JENISNYA - KIMIA - 2025

The kromatogram adalah catatan grafis dua dimensi diperoleh pada media penyerap, menunjukkan pemisahan zat dengan kromatografi. Pola, puncak atau bintik yang terlihat, terbentuk pada kromatogram, yang mencerminkan pemisahan fisik komponen campuran.

Gambar di bawah adalah kromatogram dengan tiga puncak, A, B dan C, dari tiga komponen sampel yang dipisahkan dengan kromatografi. Teramati bahwa masing-masing dari ketiga puncak tersebut memiliki ketinggian dan lokasi yang berbeda pada sumbu waktu kromatogram.

Kromatogram tipikal. Sumber: Heliagon, dari Wikimedia Commons

Sumbu ordinat atau Y mencatat informasi intensitas sinyal (dalam milivolt mV dalam kasus ini). Merepresentasikan rekaman, tergantung pada detektor, dari beberapa properti fisik zat atau komponen terpisah dari campuran.

Ketinggian puncak sebanding dengan konsentrasi komponen yang dipisahkan dari sampel dalam sistem yang optimal. Jadi, misalnya, mudah untuk membayangkan bahwa komponen B memiliki proporsi yang lebih tinggi daripada A dan C.

Pada sumbu absis atau X, waktu retensi komponen sampel atau campuran diwakili. Ini adalah waktu yang berlalu dari injeksi sampel sampai berhenti, karena berbeda untuk setiap zat murni.

Untuk apa kromatogram?

Ini adalah catatan akhir dari keseluruhan proses kromatografi. Parameter yang menarik analitis diperoleh darinya. Ini dapat diperoleh sebagai file elektronik, histogram tercetak atau pada media proses; di atas kertas, misalnya.

Sumbu Y dihasilkan oleh detektor respons sinyal atau intensitas, seperti spektrofotometer. Analisis waktu yang optimal, karakteristik puncak atau bintik yang diperoleh sangat penting; ukuran, lokasi, warna, dan aspek lainnya.

Analisis kromatogram umumnya memerlukan penggunaan kontrol atau standar, zat dengan identitas dan konsentrasi yang diketahui. Analisis kontrol ini memungkinkan untuk menetapkan dengan perbandingan dengan sampel karakteristik dari komponen sampel yang diselidiki.

Dalam kromatogram Anda dapat mengamati dan menganalisis bagaimana pemisahan komponen suatu campuran dilakukan. Studi optimalnya memungkinkan untuk mengidentifikasi zat, menunjukkan kemurniannya, mengukur jumlah zat yang ada dalam campuran, di antara aspek lainnya.

Informasi yang diekstraksi dapat bersifat kualitatif; misalnya, ketika zat diidentifikasi dan kemurniannya ditentukan. Informasi kuantitatif berkaitan dengan penentuan jumlah komponen dalam campuran dan konsentrasi analit yang dipisahkan.

Identifikasi zat

Dengan menganalisis hasil kromatogram, berbagai zat dapat diidentifikasi dengan membandingkan waktu retensi dengan zat yang diketahui. Hal ini dapat diamati jika zat yang diteliti menempuh jarak yang sama jika memiliki waktu yang sama dengan zat yang diketahui.

Misalnya, kromatogram dapat mendeteksi dan mengidentifikasi metabolit obat-obatan seperti stimulan dan steroid dalam urin atlet. Ini merupakan dukungan penting dalam studi dan penelitian beberapa metabolit yang dihasilkan oleh kelainan genetik pada bayi baru lahir.

Kromatogram memfasilitasi pendeteksian hidrokarbon terhalogenasi yang ada dalam air minum, di antara zat lainnya. Ini penting dalam analisis laboratorium kendali mutu, karena memungkinkan deteksi dan identifikasi kontaminan yang ada dalam berbagai produk.

Klasifikasi kemurnian zat

Dalam kromatogram Anda dapat membedakan antara zat murni dan tidak murni. Zat murni akan menghasilkan satu puncak pada kromatogram; sedangkan zat yang tidak murni akan menghasilkan dua atau lebih puncak.

Dengan menyesuaikan kondisi di mana kromatografi dilakukan, dua zat dapat dicegah membentuk satu puncak.

Kuantifikasi zat

Dengan menganalisis luas puncak kromatogram, konsentrasi komponen sampel dapat dihitung.

Oleh karena itu, luas puncak sebanding dengan jumlah zat yang ada dalam sampel. Data kuantitatif ini diperoleh dalam sistem yang sangat sensitif, seperti yang dihasilkan oleh gas atau kromatografi cair, misalnya.

Jenis

Salah satu klasifikasi kromatogram berkaitan erat dengan berbagai jenis kromatografi, yang menghasilkan kromatogram yang sesuai.

Bergantung pada kondisi pengoperasian, detektor, di antara aspek lainnya, kromatogram akan bervariasi dalam konten dan kualitasnya.

Kromatogram di atas kertas atau lapisan tipis

Kromatogram dapat dibuat langsung di atas kertas atau lapisan tipis, yang secara langsung menunjukkan distribusi atau distribusi komponen sampel.

Ini sangat berguna untuk pemisahan dan studi zat berwarna yang memiliki pigmen alami, seperti klorofil. Ini dapat mengalami proses pengembangan jika zat tersebut tidak memiliki warna alami, dan ini berguna untuk studi kualitatif.

Kromatogram dihasilkan oleh detektor

Kromatogram juga dapat diperoleh dengan menggunakan detektor yang merekam respons, keluaran, atau sinyal akhir dari kromatografi. Seperti yang disebutkan sebelumnya, detektor ini biasanya berupa spektrofotometer, spektrometer massa, sequencer otomatis, elektrokimia, dan lain-lain.

Kromatogram yang dihasilkan dalam kolom, baik gas atau cairan, serta resolusi tinggi dalam lapisan tipis, menggunakan detektor.

Bergantung pada jenis detektor, kromatogram dapat diklasifikasikan sebagai diferensial atau integral, bergantung pada bentuk respons detektor.

Kromatogram diferensial

Detektor diferensial terus menerus mengukur sinyal respons dari kromatogram, sedangkan detektor integral mengukur sinyal yang sesuai secara kumulatif.

Kromatogram diferensial adalah kromatogram yang diperoleh dengan detektor diferensial. Detektor ini mencakup, misalnya, spektrofotometer dan detektor untuk perubahan konduktivitas listrik.

Jenis kromatogram ini telah menunjukkan hasil pemisahan anion dari suatu sampel yang dideteksi dengan fotometri tidak langsung. Hasil yang sama juga telah diperoleh untuk studi ion, misalnya dengan deteksi akhir dengan konduktimetri.

Kromatogram diferensial. Sumber: Pixabay

Grafik di atas menunjukkan contoh kromatogram diferensial, yang diperoleh dengan pengurut DNA otomatis (asam deoksiribonukleat). Grafik tersebut dengan jelas menunjukkan puncak empat warna, satu warna untuk setiap basa nitrogen dalam DNA.

Melalui dukungan program terkomputerisasi, interpretasi urutan basa DNA yang dianalisis difasilitasi, serta untuk analit yang lebih kompleks.

Kromatogram integral

Kromatogram integral sesuai dengan yang diperoleh oleh detektor integral. Kromatogram ini menunjukkan keluaran dari satu komponen yang diteliti. Beberapa puncak tidak diperoleh seperti pada diferensial.

Dalam kromatogram integral, rekaman diperoleh dengan bentuk yang digambarkan sebagai langkah. Bentuk ini adalah bagian kromatogram yang sesuai dengan jumlah zat tunggal yang keluar dari kolom.

Referensi

1. Bhanot, D. (2013). Bagaimana cara membaca kromatogram? Diperoleh dari: lab-training.com
2. Carey, FA (2006). Kimia Organik Edisi Keenam. Mc Graw Hill Publishing House
3. Kromatografi Hari Ini. (2014). Apa itu Kromatogram? Diperoleh dari: chromatographytoday.com
4. Mathias, J. (2018). Panduan Pemula: Cara Menafsirkan Hasil Spektrometri Massa Kromatografi Kromatografi Gas. Diperoleh dari: innovatechlabs.com
5. Perkumpulan Kromatografi dan Teknik Terkait Spanyol. (2014). Kromatogram. Diperoleh dari: secyta.es
6. Wikipedia. (2019). Kromatografi Kertas. Diperoleh dari: wikipedia.org