ANTISTREPTOLYSIN O: KUANTIFIKASI, RASIONAL, TEKNIK, PATOLOGI - BIOLOGI - 2025

The O ASO adalah antibodi yang dihasilkan dalam menanggapi infeksi yang disebabkan oleh Streptococcus pyogenes, juga dikenal sebagai Streptococcus beta-hemolitik A. Kelompok ini menghasilkan dua exotoxins dengan aktivitas hemolitik panggilan streptolysins "S" dan "O" .

Streptolysin S bertanggung jawab atas hemolisis beta yang terjadi pada agar darah dan, meskipun bersifat toksik bagi sel-sel tertentu dari sistem kekebalan, ia tidak bersifat antigenik. Sementara streptolysin O, yang labil terhadap oksigen, bertanggung jawab atas hemolisis yang terjadi di bawah agar darah dan bersifat antigenik.

Streptococcus pyogenes / Diagram tentang apa yang terjadi dalam uji ASTO (reaksi aglutinasi). (Antibodi terikat pada partikel lateks yang mengandung antigen spesifik). Sumber: Pengguna: Graham Beards / Alejandro Porto

Oleh karena itu, ketika sel-sel sistem kekebalan berinteraksi dengan streptolysin O, respons imun spesifik dihasilkan, yang menghasilkan aktivasi limfosit B. Sel-sel ini menghasilkan antibodi yang diarahkan melawan streptolysin O. Oleh karena itu, antibodi disebut antistreptolysin O.

Streptococcus pyogenes menghasilkan berbagai patologi, antara lain: tonsilitis, erisipelas, impetigo, demam nifas, demam berdarah dan septikemia. Antibodi anti-streptolysin O muncul 8 sampai 30 hari setelah dimulainya infeksi.

Sebagian besar infeksi ini sangat umum terjadi pada populasi, sehingga umum bagi orang untuk memiliki antibodi antistreptolysin O dalam darahnya. Titer yang rendah menunjukkan infeksi bakteri ini di masa lalu, tetapi titer yang tinggi atau meningkat menunjukkan infeksi yang baru atau sedang berlangsung.

Kuantifikasi antibodi antistreptolysin O.

Di laboratorium, titer antibodi anti-streptolysin "O" dapat diukur melalui tes serologis. Tes antistreptolysin O (ASTO) didasarkan pada reaksi aglutinasi dengan lateks.

Ini dapat dilakukan secara semi-kuantitatif, pelaporan dalam persilangan atau titer juga dapat dikuantifikasi. Normal dan tidak signifikan untuk menemukan nilai hingga 200 IU / ml atau unit Todd / ml. Di atas nilai ini dianggap positif dan signifikan secara klinis.

Tes ini tidak mengharuskan pasien berpuasa. Serum digunakan sebagai sampel, yaitu darah pasien diambil dan ditempatkan dalam tabung tanpa antikoagulan, kemudian disentrifugasi untuk diambil serumnya.

Dasar dari teknik ASTO

Teknik ini menggunakan partikel lateks sebagai pendukung untuk memfiksasi antigen streptolysin O. Partikel antigen yang terserap direaksikan dengan serum pasien. Jika pasien memiliki antibodi antistreptolysin O, antibodi ini akan mengikat antigen yang menempel pada partikel lateks.

Pengikatan ini menyebabkan aglutinasi yang terlihat secara makroskopis. Intensitas reaksi berbanding lurus dengan konsentrasi antibodi yang ada.

Teknik

- Teknik semi kuantitatif

Intensitas reaksi dapat dikuantifikasi dengan persilangan. Untuk melakukan ini, pelat reaksi serologis diambil dan ditempatkan:

50 µl serum dan 50 µl reagen ASTO. Aduk rata dengan tusuk gigi kayu dan masukkan ke dalam mixer otomatis selama 2 menit. Mengamati. Jika rotator otomatis tidak tersedia, itu harus dilakukan secara manual.

Penafsiran

Suspensi tanpa gumpalan (seragam): negatif

1. + = reaksi lemah

2. ++ = reaksi ringan

3. +++ = reaksi sedang

4. ++++ = reaksi kuat

Sera yang positif dengan persilangan 3 dan 4 dapat dikuantifikasi.

- Teknik kuantitatif

Untuk menghitung titer, dibuat pengenceran serial 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Untuk melakukan ini, lakukan sebagai berikut: 4 tabung reaksi atau tabung Kahn diambil dan 0,5 ml saline fisiologis ditempatkan pada semuanya. Kemudian 0,5 ml serum pasien ditambahkan ke tabung pertama. Teraduk rata. Tabung itu sesuai dengan pengenceran 1: 2.

Selanjutnya 0,5 ml dipindahkan ke tabung 2 dan diaduk rata. Tabung ini sesuai dengan pengenceran 1: 4 dan seterusnya, sampai pengenceran yang diinginkan tercapai.

Ambil 50 µl setiap pengenceran dan reaksi dengan 50 µl pereaksi ASTO pada plat aglutinasi, seperti yang dijelaskan dalam teknik semi-kuantitatif.

Penafsiran

Pengenceran tertinggi di mana aglutinasi yang terlihat diamati dipertimbangkan. Perhitungannya dilakukan sebagai berikut:

ASTO = Kebalikan dari pengenceran positif tertinggi x sensitivitas teknik (konstanta).

Contoh: Pasien dengan reaksi positif hingga 1: 8

ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml atau Todd Unit / ml.

Nilai referensi

Dewasa normal: hingga 200 IU / ml

Anak-anak normal: hingga 400 IU / ml

rekomendasi

Direkomendasikan bahwa kontrol positif dan negatif dipasang dengan pasien untuk memastikan bahwa reagen dalam kondisi optimal. Jika kontrol positif tidak menggumpal atau kontrol negatif menggumpal, reagen tidak dapat digunakan.

Reaksi harus ditafsirkan setelah 2 menit, setelah itu tidak valid jika terjadi aglutinasi. Ini adalah positif palsu.

Sera hiperlipemik mengganggu reaksi. Mereka bisa memberikan positif palsu.

Nilai ASTO yang terisolasi tidak terlalu membantu. Itu harus dibarengi dengan gejala.

Selain itu, disarankan untuk melakukan setidaknya 2 pengukuran ASTO ketika dicurigai terjadi demam rematik atau glomerulonefritis pasca streptokokus, untuk menunjukkan peningkatan kadar antistreptolysin O dan dengan demikian memastikan diagnosisnya.

Patologi dengan titer antistreptolysin O tinggi

Antibodi anti-streptolysin meningkat setelah menderita Streptococcus pyogenes atau infeksi Streptococcus ß-hemolitik grup A.

Diantaranya adalah: faringitis akut, demam berdarah, impetigo, erisipelas, demam nifas dan septikemia.

Beberapa pasien yang baru saja menderita infeksi streptokokus atau berulang dapat mengembangkan penyakit autoimun sebagai sekuel atau komplikasi dari infeksi pasca streptokokus, seperti glomerulonefritis akut dan demam rematik.

Penyakit autoimun pasca streptokokus

Demam rematik

Ini adalah komplikasi inflamasi atau gejala sisa yang dapat muncul 1 hingga 5 minggu setelah mengalami infeksi streptokokus. Titer antistreptolysin O meningkat secara signifikan 4 sampai 5 minggu setelah onset penyakit.

Titer ASTO yang tinggi memandu diagnosis, tetapi tidak terkait dengan tingkat keparahan penyakit, dan penurunannya tidak berarti perbaikan.

Antibodi antistreptolysin O bereaksi silang melawan kolagen dan serat otot, mempengaruhi organ tertentu (antara lain jantung, kulit, persendian, dan sistem saraf).

Komplikasi atau gejala sisa ini terjadi dengan keterlibatan jantung, demam, malaise, poliartritis migrasi non-supuratif, chorea, dll.

Glomerulonefritis akut

Glomerulonefritis akut adalah gejala sisa non-supuratif yang disebabkan oleh pengendapan kompleks antigen-antibodi pada membran basal glomerulus.

Pembentukan dan sirkulasi kompleks antigen-antibodi (ag-ac) yang dihasilkan oleh infeksi streptokokus dapat menyebabkan perubahan eksudatif dan peradangan glomeruli, dengan proteinuria dan hematuria.

Kompleks ag-ac ini disimpan dalam glomerulus dan mengaktifkan kaskade komplemen, yang mengakibatkan kerusakan endotel glomerulus. Untuk alasan ini, ini dianggap sebagai penyakit autoimun, karena sistem kekebalan individu merusak jaringannya sendiri.

Antibodi antistreptolysin O sangat tinggi dan tingkat komplemen rendah.

Referensi

1. Laboratorium Wiener. Lateks ASO. 2000. Tersedia di: wiener-lab.com.ar
2. Kontributor Wikipedia. "Anti-streptolysin O." Wikipedia, ensiklopedia gratis. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23 Januari 2019. Web. 19 Juli 2019.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O titer dalam kesehatan dan penyakit: tingkat dan signifikansi. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Tersedia di: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Cara menggunakan titer antistreptolysin O. Arch Dis Child Educ Pract Ed.2014; 99 (6): 231-8. Tersedia di: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologis. (Edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Manual Mikrobiologi Medis. Edisi kedua, Venezuela: Direktorat Media dan Publikasi Universitas Carabobo.