LOOP BAKTERIOLOGIS: KARAKTERISTIK, JENIS, PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2025

The Loop bakteriologis adalah instrumen kerja yang digunakan oleh ahli mikrobiologi untuk menabur kultur mikroba (bakteri atau jamur). Ini mungkin instrumen yang paling banyak digunakan oleh para profesional ini.

Penggunaannya terkesan sederhana, namun pada kenyataannya membutuhkan banyak pelatihan. Sebelum mulai disemai, loop harus disterilkan dalam pembakar Bunsen, kemudian diambil inokulum mikroba yang berasal dari kultur cair atau kultur padat.

Jenis loop bakteriologis. Sumber: Tidak ada penulis yang dapat dibaca mesin. ば や お diasumsikan (berdasarkan klaim hak cipta).

Setelah inokulum diambil, dapat disimpan dalam media cair atau disemai dalam media padat. Setelah setiap prosedur, loop disterilkan kembali. Pegangannya juga cocok untuk membuat noda mikroba pada slide.

Loop bakteriologis memiliki banyak nama, antara lain: loop atau loop platinum, loop inokulasi atau loop seeding, namun nama aslinya adalah loop Kohle.

Bahan yang digunakan untuk membuat gagang umumnya adalah paduan nikel-kromium (nichrome) atau platina. Varietas lain yang tersedia di pasar adalah loop bakteriologis sekali pakai plastik.

Di sisi lain, ada beberapa jenis loop bakteriologis, yang masing-masing memenuhi fungsi dalam tugas yang dilakukan oleh seorang ahli mikrobiologi. Pilihan pegangan akan tergantung pada apa yang perlu dilakukan.

Misalnya, untuk melakukan deplesi striatum untuk mengisolasi mikroorganisme, loop platinum digunakan, yang berakhir pada cincin tertutup, terlepas dari apakah itu dikalibrasi atau tidak.

Sedangkan jika hendak menabur sampel urin yang penting untuk menghitung CFU, perlu menggunakan loop terkalibrasi. Demikian pula, untuk menginokulasi uji biokimia, yang perlu disemai dengan tusukan, loop jarum sangat penting. Penting agar pegangannya ditangani oleh personel terlatih.

karakteristik

Loop bakteriologis terdiri dari dua ekstrem. Salah satu ujungnya sesuai dengan pegangan atau alasnya, sedangkan ujung lainnya adalah pegangan itu sendiri.

Tangani alas atau pegangan

Alasnya berfungsi untuk pegangan pegangan saat memegang. Biasanya terbuat dari logam, tetapi memiliki insulator panas untuk mencegah operator terbakar saat ujung gagang disterilkan pada korek api. Ukurannya kira-kira 20 cm, meski bisa lebih panjang. Ini memiliki utas untuk menyesuaikan pegangan.

Menangani

Itu adalah tujuan fungsional, yaitu bagian yang bersentuhan dengan mikroorganisme dan dengan media kultur. Ini terdiri dari kawat halus yang dimasukkan ke alas.

Gagangnya bisa terbuat dari nichrome atau platinum, itulah sebabnya kadang disebut gagang platina. Panjangnya sekitar 6,5 cm dan memiliki ukuran sekitar 0,20 mm. Pegangan dengan gagang bisa berukuran 26,5 cm. Pengukuran dapat berbeda dari pabrikan ke pabrikan.

Jenis

Ada beberapa jenis loop bakteriologis dan masing-masing memiliki kegunaan khusus. Jenis gagang adalah sebagai berikut: gagang berbentuk cincin terkalibrasi, gagang berbentuk cincin tidak terkalibrasi, gagang lurus atau jarum, gagang spatulasi, gagang berbentuk "L", dan gagang berujung lancip.

Di sisi lain, pegangannya bisa permanen atau sekali pakai. Yang untuk penggunaan permanen disterilkan dalam korek api, dapat digunakan kembali dan sangat tahan lama. Meskipun produk sekali pakai steril dari pabrik, hanya digunakan sekali dan dibuang.

Aplikasi

Pegangan cincin, tidak dikalibrasi

Ini adalah pegangan yang paling banyak digunakan di laboratorium mikrobiologi. Ini digunakan untuk mengambil inokulum dari suspensi mikroba (media cair) atau sebagian koloni (media padat), untuk disemai di media kultur lain, baik uji biokimia atau media yang lebih diperkaya atau selektif, seperti kasusnya. Ini juga berguna untuk membuat noda mikroba pada slide.

Dengan jenis loop ini, inokulum awal dapat dilakukan goresan. Ia juga dirancang agar meluncur dengan mulus di atas agar-agar, tanpa merusaknya. Tentu saja, ini membutuhkan staf yang terlatih untuk menangani teknik penyemaian, menerapkan gaya dan gerakan yang benar untuk membuat lurik yang baik.

Berbagai teknik penyemaian bisa dilakukan dengan gagang ini. Contoh media padat pada cawan petri biasanya diunggulkan dengan cara kelelahan (ada beberapa teknik, lihat video 1).

Teknik ini dimaksudkan untuk mendapatkan koloni yang terisolasi untuk dipelajari dan diidentifikasi, terutama bila sampelnya polimikroba, yaitu kulturnya tidak murni (mengandung lebih dari satu jenis mikroorganisme).

Sebagai gantinya, baji ditanam secara zigzag sederhana untuk mendapatkan massa bakteri, dalam hal ini koloni tidak perlu diisolasi.

Terkadang mereka juga digunakan untuk mengambil sampel tertentu. Misalnya, Rojas dan rekannya menggunakan lingkaran bakteriologis untuk mengumpulkan sampel kerokan dari jaringan vagina pada tikus.

Lingkaran bakteriologis dengan ujung cincin, tidak dikalibrasi. Sumber: Pixinio.com

Pegangan berbentuk cincin, dikalibrasi

Pegangan ini sesuai dengan namanya dikalibrasi untuk mengambil suspensi mikroba dalam jumlah tertentu. Ini digunakan ketika inokulum perlu sesuai dengan standar dalam bidang ini.

Misalnya, sangat umum untuk menanam kultur urin. Dalam hal ini, loop yang dikalibrasi 0,01 ml dan 0,001 ml dapat digunakan.

Perlu dicatat bahwa gagang yang dikalibrasi memiliki margin kesalahan, yang bervariasi sesuai dengan sudut pengambilan sampel dan ukuran mulut wadah.

Jika loop 0,001 ml dimasukkan secara vertikal ke dalam wadah dengan mulut kecil (≤ 7 mm), jumlah yang diambil akan menjadi 50% lebih sedikit dari yang diinginkan.

Hal ini terjadi karena semakin kecil diameter mulut wadah maka tegangan permukaan akan semakin tinggi sehingga gaya rekat antar wadah (gelas - cairan) semakin meningkat. Ini menyebabkan muatan cairan yang diambil oleh pegangan menjadi lebih sedikit.

Sedangkan jika diambil pada sudut 45 ° dalam wadah dengan mulut lebar (≥ 22 mm), dapat dikumpulkan 150% lebih dari jumlah yang dibutuhkan. Dalam hal ini, tegangan permukaan lebih rendah dan gaya kohesi kaca / plastik berkurang, sedangkan gaya kohesi cair-cair meningkat.

Karena hal di atas, metode lain untuk penghitungan unit pembentuk koloni terkadang lebih disukai untuk kultur urin.

Gagang lurus atau jarum

Ini juga disebut pegangan benang. Ini digunakan untuk menginokulasi tes biokimia tertentu, terutama yang perlu diunggulkan dengan teknik tusukan. Contoh media semi padat yang disiapkan dalam bentuk blok, seperti: media SIM, MIO dan O / F.

Selain itu, dalam kasus MIO dan SIM yang menilai motilitas, penusukan harus dilakukan dengan loop jarum, karena interpretasi motilitas positif terjadi saat bakteri tumbuh ke arah sisi inokulum awal.

Tes yang diinokulasi dengan loop loop dapat memalsukan hasil (positif palsu). Untuk alasan ini, dalam jenis pembibitan ini, harus diperhatikan bahwa tusukannya unik, dan bila dilepas, keluar ke arah yang sama dengan saat masuk.

Tes lain yang harus diunggulkan dengan jarum meskipun sudah disiapkan dalam bentuk baji adalah Kligler. Dalam pengujian ini, oksigen tidak disarankan untuk menembus jauh ke dalam agar-agar, karena media yang kekurangan oksigen diperlukan untuk terjadinya reaksi kimia tertentu. Pegangan ini juga digunakan untuk menyentuh koloni tertentu untuk tujuan subkultur.

Pegangan spatulasi

Kebanyakan mikroorganisme menghasilkan koloni yang lembut dan mudah lepas. Namun terdapat beberapa agen mikroba yang koloninya keras dan kering, misalnya mikobakteri pada umumnya dan beberapa jamur. Dalam kasus ini, berguna untuk menggunakan gagang spatulat.

Gagang berbentuk "L"

Penggunaannya yang paling sering adalah untuk membunyikan kultur jamur, terutama jamur.

Pegangan ujung tajam

Ini berguna untuk mengambil koloni yang sangat kecil yang ada dalam kultur polimikroba, agar dapat mensubkulturnya.

Teknik menabur

Video 1

Sterilisasi gagang platina

Pegangan harus disterilkan sebelum dan sesudah digunakan. Untuk mensterilkan lingkaran bakteriologis di dalam korek api, lakukan sebagai berikut: gagang harus diletakkan di atas api, dengan posisi se-vertikal mungkin, sedemikian rupa untuk mensterilkan dari ujung ke atas.

Ketika filamen halus berubah menjadi merah terang, maka dapat dikatakan steril. Untuk menggunakannya, didinginkan dan sampel yang dipilih diambil. (Lihat video 2).

Sterilisasi loop bakteriologis

Video 2

Referensi

1. "Lingkaran bakteriologis" Wikipedia, The Free Encyclopedia. 23 Jul 2019, 13:31 UTC. 18 Agustus 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Pegangan logam yang dikalibrasi untuk ahli mikrobiologi: Alternatif manufaktur nasional. Soc. Ayo. Mikrobiol. 2010; 30 (1): 37-42. Tersedia di: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologis. Edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, dkk. Penentuan efek analgesik ekstrak heksana bunga Eupatorium arsenei pada model nyeri akut pada tikus. mex. ilmu. tanah pertanian. 2015; 46 (1): 64-69. Tersedia di: scielo.org