- Komposisi minyak imersi
- Karakteristik minyak perendaman
- Dasar-dasar Minyak Perendaman
- Kegunaan atau aplikasi
- Langkah-langkah mengamati sediaan menggunakan minyak imersi
- peduli
- Referensi
The minyak imersi adalah cairan bening kental memiliki indeks yang tinggi bias. Untuk alasan ini, ia banyak digunakan dalam pengamatan mikroskopis, karena ia memberikan sifat memusatkan cahaya saat melewati objektif 100X mikroskop, meningkatkan daya pisahnya.
Hal ini terjadi karena film kental terbentuk antara objektif dan noda, mencegah sinar cahaya menyebar ketika mencapai udara, sehingga memusatkan berkas cahaya ke arah sampel.
Penetes dengan perendaman minyak dan mikroskop difokuskan dengan tujuan 100X menggunakan pencelupan minyak. Sumber: Pixabay.com
Minyak imersi hanya digunakan dengan tujuan 100X. Itulah mengapa tujuan 100X juga disebut sebagai tujuan pencelupan. Sisanya dikenal sebagai target kering. Lensa ini tidak dapat digunakan tanpa minyak imersi, karena tanpanya visualisasi tidak akan memuaskan.
Fungsi utama minyak imersi adalah memberikan gambar yang lebih jelas, lebih tajam, dan lebih jelas, memungkinkan pengamatan detail yang tidak dapat dilakukan dengan lensa lain.
Minyak pertama yang digunakan untuk tujuan ini adalah minyak adas manis, digunakan bersama dengan lensa pencelupan pertama yang dibuat oleh Giovanni Battista Amici. Ini hanya mencegah penyimpangan kromatik, tetapi tidak meningkatkan bukaan numerik sistem lensa.
Kemudian minyak cedar digunakan, tetapi memiliki banyak kekurangan yang memaksa tidak digunakan lagi. Diantaranya adalah keasamannya yang tinggi, yang merusak tujuan dalam jangka pendek.
Selanjutnya, zat lain seperti air dan gliserin digunakan hingga tercipta minyak imersi sintetik, yang sedikit demi sedikit dimurnikan hingga mencapai minyak imersi saat ini, yang merupakan senyawa kompleks zat organik.
Komposisi minyak imersi
Minyak imersi terdiri dari campuran senyawa organik seperti: terfenil, terfenil terhidrogenasi, hidrokarbon alami, dan polibuten.
Karakteristik minyak perendaman
Immersion oil adalah cairan lampu kuning, sedikit kental dalam penampilan, dengan bau yang khas dan kepadatan antara 0,92-0,99 g / cm 3 .
Minyak imersi tidak larut dalam air, dan memiliki titik didih 340 ° C. Indeks bias a (n 20 ° C / D): berkisar antara 1,482 - 1,516. Sedangkan indeks lampu kilatnya 110 ° C dan viskositasnya berkisar antara 100 hingga 120 mPa.s.
Produk ini harus dibuang dengan benar, karena bersifat ekotoksik. Dengan kata lain, ini berbahaya bagi lingkungan, terutama mempengaruhi hewan air. Di sisi lain, dapat menyebabkan iritasi pada kulit dan selaput lendir. Jika tertelan itu nefrotoksik dan kardiotoksik.
Minyak imersi stabil pada suhu 15 hingga 25 ° C, suhu di mana ia harus disimpan.
Dasar-dasar Minyak Perendaman
Saat menggunakan lensa pembesaran yang lebih tinggi, intensitas cahaya harus ditingkatkan. Namun, banyak berkas cahaya yang hilang karena tersebar saat mencapai udara (ruang antara penutup kaca dan lensa), dan bahkan beberapa sinar dipantulkan seluruhnya.
Minyak imersi memiliki indeks bias yang mirip dengan kaca. Oleh karena itu, ketika oli bersentuhan antara lensa 100X dan penutup kaca, berkas cahaya terkonsentrasi.
Sinar terkonsentrasi melewati sampel dan mempertajam gambar, yaitu, meningkatkan apertur numerik dari tujuan dan mengoreksi penyimpangan kromatik dan bola.
Kegunaan atau aplikasi
Penggunaan minyak imersi diperlukan terutama jika diperlukan untuk mengamati gambar dengan cara yang lebih luas, menggunakan tujuan pembesaran tertinggi (tujuan 100X) untuk melihat detail yang penting untuk menegakkan diagnosis.
Oleh karena itu, banyak digunakan dalam studi mikroskopis di berbagai bidang seperti: histologi, sitologi, hematologi dan bakteriologi. Misalnya, berguna untuk mempelajari karakteristik sel dan jaringan pasien.
Ini juga digunakan untuk analisis apusan darah, di mana kami ingin merinci karakteristik hemoparasit di dalam dan di luar eritrosit, serta dalam sediaan Gram, untuk menentukan karakteristik morfotintorial mikroorganisme.
Ini umumnya digunakan dalam sediaan tetap, karena tidak dianjurkan dalam sediaan baru. Ini karena tegangan permukaan oli menyebabkan selip penutup bergeser, menyebabkan sampel bergeser selama pengamatan dan mencegah analisis.
Di sisi lain, minyak imersi tidak hanya berguna dalam mikroskop cahaya konvensional: tetapi juga digunakan dalam mikroskop fluoresensi refleksi internal total (TIRFM) dan dalam aplikasi fluoresensi confocal.
Langkah-langkah mengamati sediaan menggunakan minyak imersi
Untuk melihat slide di bawah mikroskop, slide pertama-tama harus difokuskan dengan tujuan perbesaran terendah, biasanya 10X, dengan intensitas cahaya rendah.
Kemudian menuju ke sasaran 40X, dan jalur cahaya sedikit ditingkatkan. Beberapa analisis dapat dilakukan pada pembesaran ini, tetapi pembesaran 100X diperlukan untuk melihat detail struktur.
Sebelum pindah ke obyektif 100X, setetes minyak imersi ditempatkan pada kaca penutup, tepat di tempat yang ingin diamati, lalu turret mikroskop dipindahkan untuk menemukan sasaran 100x dalam sediaan.
Intensitas cahaya diatur (ditingkatkan) (dengan menggerakkan kondensor dan membuka diafragma). Kemudian beberapa gerakan kecil dari sekrup mikrometer (maju atau mundur) harus fokus dengan sempurna jika mikroskop menggunakan tujuan parafokal.
Jika Anda mencoba memfokuskan persiapan secara langsung dengan lensa imersi, Anda mungkin kesulitan menemukan fokusnya. Ini bukan tindakan yang tidak mungkin, tetapi kesulitan meningkat secara signifikan.
peduli
Untuk menggunakan minyak imersi, kondisi tertentu harus diperhitungkan.
Setelah sediaan berwarna telah dibuat, seperti olesan yang diwarnai dengan Giemsa atau Gram, tunggu apusan tersebut benar-benar kering sebelum memasukkan minyak ke dalam rendaman. Jika tidak, minyak bersama air akan membentuk misel yang tidak memungkinkan sediaan terlihat.
Sebaliknya, setelah mengamati batch sediaan, yaitu di penghujung hari kerja, obyektif 100X harus dibersihkan dengan hati-hati, menggunakan kertas lensa dengan etanol. Jika lensa dibiarkan kotor, oli akan mengering di atasnya dan kemudian akan sangat sulit untuk dikeluarkan, merusak bidang pandang.
Demikian juga harus diperhatikan bahwa oli mudah terbakar dan harus dijauhkan dari sumber panas (korek api). Penting untuk menghindari memanaskannya di atas 65 ° C.
Terakhir, minyak adalah produk beracun. Oleh karena itu, kontak langsung dengan kulit dan selaput lendir harus dihindari, yang dapat menyebabkan iritasi ringan. Untuk menghindari kecelakaan, penggunaan sarung tangan dan kacamata pengaman sangat disarankan untuk menanganinya.
Jika terkena minyak, area tersebut harus dicuci dengan banyak air. Jika minyak memercik ke mata, itu harus dicuci dengan cara yang sama, menjaga mata tetap terbuka. Jika tertelan secara tidak sengaja, penting untuk minum air hangat dan menyebabkan muntah, selain pergi ke dokter terdekat.
Referensi
- "Total Mikroskop Fluoresensi Refleksi Internal." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 30 Des 2018, 22:46 UTC. 14 Mei 2019, 01:54
- IVD. Perendaman Minyak Mikroskopi. Tersedia di: Pengguna / Tim / Unduhan.
- Biologi Lingkungan dan Mikrobiologi. Pengoperasian mikroskop optik. Tersedia di: eumed.net/libros.
- Sánchez Lera Rita María, Oliva García Ninfa Rosa. Sejarah mikroskop dan dampaknya terhadap mikrobiologi. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355-372. Tersedia dalam: scielo.
- Herrero J. Praktek No. 1: Dasar-dasar dan penggunaan mikroskop optik senyawa umum. Universitat d´Alacant Tersedia di: rua.ua.es/dspace
- Scharlau - MSDS. Minyak imersi, untuk mikroskop. 2001. Tersedia di: insumos-labcentral.