The smear adalah alat diagnostik untuk tuberkulosis paru aktif. Ini adalah teknik laboratorium yang memungkinkan deteksi dan pengukuran basil tahan asam seperti Mycobacterium tuberculosis. Ini adalah metode yang paling banyak digunakan di seluruh dunia untuk membuat diagnosis tuberkulosis paru aktif di masyarakat dan untuk mengevaluasi manfaat pengobatan.
Tuberkulosis paru adalah penyakit menular yang disebabkan oleh Mycobacterium tuberculosis yang menginfeksi paru-paru tetapi dapat mempengaruhi organ dan sistem lain. Di seluruh dunia, lebih dari 6 juta orang menderita tuberkulosis (TB) paru.
M. tuberculosis sel dalam apusan dahak (Sumber: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) melalui Wikimedia Commons)
Mycobacterium tuberculosis dan spesies Mycobacterium non-tuberkulosis lainnya memiliki lapisan lipid pada dinding sel yang kaya akan asam mycolic, yang tahan terhadap perubahan warna asam alkohol setelah pewarnaan dengan pewarna dasar.
Oleh karena itu, metode pewarnaan khusus seperti metode Ziehl-Neelsen digunakan. Metode sederhana dan murah ini memungkinkan dinding menahan noda saat sampel dibilas dengan larutan asam, dan dinding Mycobacterium berubah menjadi merah berbeda dengan bakteri lain yang membiru.
Untuk melakukan mikroskop smear, diperlukan sampel dahak, sebaiknya diambil pada pagi hari saat bangun tidur. Sampel jaringan atau sampel cairan tubuh juga dapat digunakan.
Proses
Sampel yang akan diproses untuk mikroskop smear adalah sampel dahak, sampel jaringan, atau sampel cairan tubuh. Sampel jaringan dapat diekstraksi dengan bronkoskopi atau dengan biopsi kelenjar getah bening atau jaringan lain.
Karena tuberkulosis dapat memengaruhi organ atau sistem apa pun, sampelnya bisa sangat bervariasi, termasuk: sampel urin, cairan serebrospinal, cairan pleura, cairan asites, darah, nanah dari rongga terbuka, biopsi , dll.
Spesimen lesi ekstrapulmonal juga harus diproses untuk kultur. Sampel dahak diambil pada pagi hari setelah bangun tidur.
Beberapa sampel dapat dikumpulkan secara berurutan atau dalam beberapa hari berturut-turut. Sampel harus diberi label dalam botol tertutup dengan mulut lebar. Mereka harus memiliki data pasien, jenis sampel dan tanggal pengambilan sampel.
Prosedur teknis
- Setelah sampel diperoleh, sampel dapat disentrifugasi menjadi konsentrat atau digunakan secara langsung. Prosedur awal terdiri dari menempatkan beberapa tetes sampel dan menyebarkannya pada slide.
- Sampel ditutup dengan fuchsin yang disaring (larutan pewarnaan).
- Kemudian dipanaskan hingga keluar tiga kali emisi uap keputihan.
- Tunggu lima menit hingga sampel menjadi dingin dan cuci dengan air.
- Itu ditutup dengan larutan pemutih (alkohol asam) selama 2 menit.
- Itu dicuci lagi dengan air.
- Sampel ditutup dengan biru metilen dan didiamkan selama satu menit.
- Cuci bersih dengan air.
- Biarkan mengering di udara dan lanjutkan pengamatan di bawah mikroskop.
Foto dari mikroskop (Gambar oleh Konstantin Kolosov di www.p segar.com)
Prosedur ini cepat, sederhana, murah, dan memungkinkan sel Mycobacterium tuberculosis berwarna merah. Teknik ini disebut teknik pewarnaan Ziehl-Neelsen.
Pengamatan mikroskopis terdiri dari mengidentifikasi keberadaan basil tahan asam dan penghitungannya berdasarkan lapangan.
Sel Mycobacterium tuberculosis tampak sebagai batang merah, granular, dan melengkung dengan latar belakang biru. Mereka dapat diisolasi, dipasangkan atau dikelompokkan. Pengamatan harus dilakukan di lapangan dan setidaknya 100 bidang harus diperiksa untuk setiap smear.
Hasilnya dianggap positif bila di setiap lapangan terdapat lebih dari 10 sel M. tuberculosis. Ini sesuai dengan 5.000 hingga 100.000 basil untuk setiap mililiter sampel.
Dalam kasus ini, dianggap positif untuk Mycobacterium tuberculosis, karena Mycobacterium tuberculosis nontuberculous atau bakteri resisten asam lainnya memiliki bentuk yang berbeda dan umumnya jumlah yang diamati per bidang kurang dari 10.
Orang yang memeriksa sampel harus memiliki pengalaman atau keahlian dalam mendeteksi dan mengenali mikroorganisme ini, karena mungkin terdapat hasil negatif palsu atau positif palsu.
Ada teknik fluoroskopi lain yang lebih sensitif, tetapi jauh lebih mahal. Salah satu teknik tersebut menggunakan pewarnaan Auramine-O untuk mendapatkan fluoresensi hijau atau pewarnaan Auramine O / Rhodamine B untuk mengamati fluoresensi kuning / oranye.
Kasus positif umumnya dilakukan untuk kultur dan antibiogram untuk memastikan diagnosis dan pemilihan pengobatan yang tepat.
Untuk apa mikroskop smear?
Tuberkulosis adalah penyakit menular yang menyerang paru-paru dan organ lain serta sistem organ tubuh. Ini adalah penyakit menular yang mengakibatkan cedera serius pada sistem pernafasan yang jika tidak ditangani dengan baik dapat menyebabkan kematian pasien.
Tuberkulosis ditularkan hampir secara eksklusif melalui tetesan yang digantung di udara dari ekspektasi pasien yang terinfeksi tuberkulosis paru. Tetesan kecil ini dapat tetap berada di udara dan memiliki kemampuan untuk menginfeksi orang yang menghirupnya.
M. tuberculosis cells (Sumber: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) melalui Wikimedia Commons)
Infeksi membutuhkan waktu kontak yang lama dengan pasien yang terinfeksi yang terus-menerus meludah basil di lingkungan yang berventilasi buruk. Orang dengan imunodefisiensi lebih mungkin untuk terinfeksi.
Pasien HIV-positif lebih mungkin dibandingkan populasi lainnya untuk mengembangkan infeksi saluran pernapasan yang serius, termasuk tuberkulosis paru. Oleh karena itu pentingnya mikroskop smear sebagai metode diagnostik yang cepat dan murah untuk tuberkulosis.
Mikroskopi smear memungkinkan diagnosis bakteriologis tuberkulosis dibuat, namun, hasil positif harus dipastikan dengan penelitian lain.
Studi yang mengkonfirmasi diagnosis tuberkulosis termasuk pemeriksaan radiologis yang menunjukkan gambaran karakteristik lobus atas paru, tes tuberkulin positif, dan kultur sampel positif.
Smear negatif
Mikroskopi apus negatif tidak serta merta mengesampingkan diagnosis tuberkulosis, karena terutama bila sampelnya dahak, eliminasi basil tidak konstan. Oleh karena itu, dalam kasus ini, ketika diagnosis dicurigai, sampel serial diperlukan.
Apusan positif
Mikroskopi apus positif menunjukkan tuberkulosis dan harus dikonfirmasikan dengan pemeriksaan pelengkap lainnya. Kapanpun hasilnya positif, biakan dan antibiogram harus dilakukan.
Setelah pengobatan ditetapkan, penurunan berkelanjutan dalam skala positif dari mikroskop smear sampai mendapatkan hasil negatif, memungkinkan untuk mengontrol manfaat pengobatan.
Referensi
- Aziz, MA (2002). Penilaian kualitas eksternal untuk mikroskop smear AFB.
- Desikan, P. (2013). Mikroskopi smear sputum pada tuberkulosis: masih relevan ?. Jurnal penelitian medis India, 137 (3), 442.
- Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL, & Loscalzo, J. (2012). Prinsip-prinsip kesehatan internal Harrison (Vol. 2012). DL Longo (Ed.). New York: Bukit Mcgraw.
- Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M.,… & Muvunyi, CM (2016). Kinerja diagnostik mikroskop smear dan hasil tambahan Xpert dalam mendeteksi tuberkulosis paru di Rwanda. Penyakit menular BMC, 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosarys, MM, Díaz, R., & Mederos, LM (2016). Pentingnya pengawasan mutu bacilloscopy di laboratorium yang melakukan diagnosa tuberkulosis. Chilean Journal of Infectology: Official Organ of the Chilean Society of Infectology, 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). Manual untuk diagnosis bakteriologis tuberkulosis: standar dan panduan teknis: mikroskop smear bagian 1. Dalam Manual untuk diagnosis bakteriologis tuberkulosis: standar dan panduan teknis: mikroskop smear bagian 1 (hlm. 64-64).