KONGO MERAH: KARAKTERISTIK, PERSIAPAN DAN APLIKASI - BIOLOGI - 2025

The Congo merah adalah zat warna azo untuk protein yang dibentuk oleh kopling garam diazonium dan cincin aromatik aktif. Zat ini mampu menyerap radiasi elektromagnetik dalam spektrum yang terlihat, itulah sebabnya ia memiliki warna yang pekat.

Itu bermuatan negatif. Oleh karena itu, ia memiliki afinitas untuk komponen seluler yang bermuatan positif, seperti zat protein tertentu. Warnanya bervariasi sesuai dengan pH. Dalam hal ini, jika medianya bersifat asam (<dari pH3), warnanya menjadi biru pekat. Antara pH3 - pH 5,2 itu adalah fuchsia (zona balik), dan dengan> pH 5,2 warnanya menjadi merah tua.

Larutan koloid Kongo Merah dan Kongo Merah dehidrasi. Sumber: Pixinio.com dan Wikipedia.com

Ini adalah zat yang sangat serbaguna, karena memiliki banyak kegunaan. Ini telah digunakan sebagai pewarna dalam industri tekstil, dan juga untuk sel dan kain.

Juga untuk membuat media kultur yang mengukur aksi enzimatis, sebagai indikator pH, sebagai zat pengontrol dalam evaluasi berfungsinya spektrofotometer, dalam studi pembentukan biofilm, atau dalam diagnosis amiloid.

Demikian juga, telah memungkinkan untuk membedakan serotipe bakteri dan jamur dengan mengidentifikasi struktur spesifik di dindingnya (lipopolisakarida).

Karakteristik Kongo merah

Zat ini ditemukan oleh Böttiger pada tahun 1884. Ini adalah turunan diazonium yang dibentuk oleh asam bis-diazoat dari benzidin dengan asam naftionat. Molekul merah Kongo mengukur 21 Armstrong dan berat molekul kira-kira 8000 g / mol.

Kongo merah ditandai dengan larut dalam air, dan terlebih lagi dalam pelarut organik seperti etanol, membentuk larutan koloid.

Ia memiliki afinitas untuk selulosa, untuk jaringan amiloid, dan untuk komponen seluler bermuatan positif.

Persiapan

Kongo Merah dibuat dalam konsentrasi berbeda tergantung pada teknik yang akan digunakan. Sebagian besar menggunakan merah Kongo pada 1%, 2%, 0,1%, antara lain.

Misalnya, untuk menyiapkan 2% Kongo merah, 2 g pewarna makanan dehidrasi harus ditimbang dan 100 ml air suling ditambahkan. Kemudian disimpan dalam botol kuning.

Aplikasi

Sebagai pewarna di industri tekstil

Dulu banyak digunakan di industri tekstil karena fiksasinya pada kapas, tetapi saat ini tidak digunakan karena karsinogenik dan juga karena warnanya tidak stabil, berubah warna dengan menggosok.

Penentuan kapasitas pembentukan biofilm

Kapasitas mikroorganisme pembentuk biofilm telah terbukti menjadi faktor virulensi.

Dalam pengertian ini, pewarna merah Kongo digunakan sebagai metode untuk menentukan pembentukan biofilm. Kongo merah mengikat eksopolisakarida yang ada di biofilm. Namun, dibandingkan dengan metode lain, metode ini paling tidak direkomendasikan karena tingginya negatif palsu yang terjadi.

Metodenya menggunakan agar Kongo merah, terdiri dari agar darah sebagai basa, glukosa (10 g / l) dan pewarna merah Kongo (0,4 g / l). Strain yang akan dievaluasi disemai dalam medium dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 ° C, kemudian diinkubasi selama 48 jam pada suhu kamar.

Tes positif dibuktikan jika koloni kristal berwarna hitam dan penampilan kering diamati.

Kontrol kualitas spektrofotometer

Untuk menilai apakah peralatan pengukur absorbansi atau transaksi memenuhi parameter fotometri yang ditetapkan oleh peraturan internasional, teknik sederhana dapat digunakan untuk menetapkan apakah peralatan tersebut memancarkan hasil dalam rentang yang dapat diterima.

Salah satu teknik evaluasi yang dilakukan adalah dengan menggunakan Congo red berdasarkan titik isosbestic.

Titik isosbestik adalah panjang gelombang di mana warna merah Kongo memancarkan absorbansi yang sama secara independen dari pH, konsentrasi, dan suhu. Nilai absorbansi ditetapkan dan dapat digunakan sebagai acuan.

Titik isosbestik teoritis Kongo merah diketahui 541 nm. Jika nilai yang diperoleh berbeda, maka peralatan tersebut memiliki masalah pergeseran panjang gelombang, dan perlu dilakukan pengecekan oleh teknisi khusus.

Penyusunan media kultur

Ortiz et al Menjelaskan media kultur yang dibuat dengan pewarna merah Kongo dan karboksimetilselulosa yang disebut agar CMC, untuk mendeteksi strain mikroba selulit; yaitu, penghasil selulase (endogluconeses, exoglucanases dan ß-glukosidase).

Media ini memiliki pewarnaan yang intens. Warna tersebut akan hilang akibat aksi enzim endoglikanase yang memecah struktur karboksimetilselulosa. Ini menunjukkan reaksi positif.

Penurunan viskositas dan absorbansi memungkinkan aktivitas enzim diukur. Misalnya pada strain Streptomyces sp.

Identifikasi mikroorganisme

Kongo merah memiliki afinitas untuk struktur polisakarida dari strain tertentu, sehingga mencapai identifikasi mikroorganisme tersebut. Diantaranya adalah Escherichia coli, dan Shigella flexneri.

Cawan agar-agar Kongo merah juga digunakan untuk mendapatkan koloni yang khas, seperti kasus Azospirillum sp, yang antara lain menghasilkan koloni merah-merah.

Pewarnaan sel dan jaringan

Salah satu aplikasi paling umum dari Kongo merah adalah kegunaannya dalam diagnosis amiloidosis. Penyakit aneh ini terdiri dari akumulasi ekstraseluler protein abnormal di berbagai organ. Protein abnormal ini dibuat di sumsum tulang dan disebut amiloid.

Kongo merah memiliki afinitas tinggi untuk zat ini. Properti ini telah digunakan untuk menunjukkan keberadaannya di bagian jaringan histologis. Kongo Merah digunakan bersama dengan Hematoxylin / Eosin untuk tujuan ini.

Penyatuan jaringan amiloid dan Kongo merah terjadi melalui ikatan hidrogen non-polar, antara gugus karboksil dan gugus amino. Protein amiloid menyediakan gugus karboksil (COOH) dan Kongo merah sebagai gugus amino.

Jaringan amiloid diwarnai dalam berbagai warna mulai dari merah muda hingga merah tua bila dilihat di bawah mikroskop cahaya. Dalam mikroskop dengan cahaya terpolarisasi ganda, preparat ini diamati dengan birefringence hijau-apel patognomonik.

Artinya, mereka menghadirkan dichroisme, karena serat amyeloid bersifat anisotropik. Pengamatan ini memastikan diagnosisnya.

Pewarnaan jaringan dengan Congo red kompatibel dengan metodologi diagnostik lain, seperti metode imunositokimia, dan bahkan dapat diwarnai ulang.

Sebagai indikator pH

Sifat berbalik melawan perubahan pH digunakan dengan teknik yang disebut kromoendoskopi.

Teknik ini menggunakan pewarna dan indikator pH yang memungkinkan deteksi patologi tertentu. Diantaranya adalah penggunaan Congo red, yang dapat mengungkapkan fokus awal kanker pada mukosa lambung, yang digunakan sebagai penanda keasaman.

Teknik ini didasarkan pada fakta bahwa Kongo merah pada pH asam berwarna hitam. Oleh karena itu, setelah menempatkan larutan Kongo merah pada mukosa lambung, daerah di mana terdapat pucat akan dipilih untuk diambil sampelnya untuk biopsi, yaitu di mana tidak ada produksi asam. Ini menunjukkan adanya fokus kanker atau hilangnya sel parietal.

Referensi

1. "Kongo Merah." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 8 Mei 2019, 12:13 UTC. 16 Mei 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Metode baru untuk kuantifikasi aktivitas endoglikanase berdasarkan kompleks selulosa-Kongo merah. Orinoquia. 2011 Juni; 15 (1): 7-15. Tersedia dari: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Produksi biofilm dalam genotipe Staphylococcus aureus yang diisolasi dari mastitis sapi di Kuba. Rev Salud Anim. . 2013 Desember; 35 (3): 189-196. Tersedia di: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Manifestasi kulit dari amiloidosis sistemik sebagai kunci diagnostik: Kasus klinis. Pdt. Medis. Chile. 2012 April; 140 (4): 499-502. Tersedia dalam: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spektrofotometer dan Photocolorimeters Panduan pembaruan praktis. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (September-Desember): Tersedia di: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J dan Solís J. Chromoendoscopy pada infeksi Helicobacter pylori: apakah ini waktu reaksi? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Kimia organik. Pembalikan Editorial. Barcelona, ​​Spanyol. Tersedia di: books.google.co.ve
8. Teknik pewarnaan jaringan Murillo M. Histologis. Universitas Guadalajara, Meksiko. Tersedia di: academia.edu
9. Paillié M. Penentuan aktivitas selulolitik, ligninolitik dan amilolitik dari Actinobacteria yang diisolasi dari tanah rizosfer semanggi putih (Trifolium repens). 2012. Pontificia Universidad Javeriana Fakultas Ilmu Mikrobiologi Industri Bogotá DC Tersedia di: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Isolasi dan identifikasi Azospirillum sp. di rumput Guinea (Panicum maximum Jacq.) dari Lembah Cesar. Padang Rumput dan Makanan, 2010; 33 (3): 1-8 Tersedia dalam: scielo.