NEFELOMETRI: TERDIRI DARI APA DAN APLIKASINYA - KIMIA - 2024

The nephelometry melibatkan pengukuran radiasi yang disebabkan oleh partikel (dalam larutan atau suspensi) dan mengukur kekuatan radiasi tersebar pada sudut ke arah radiasi insiden.

Ketika sebuah partikel tersuspensi terkena seberkas cahaya, ada sebagian cahaya yang dipantulkan, sebagian lain diserap, yang lain dibelokkan, dan sisanya ditransmisikan. Inilah mengapa ketika cahaya mengenai medium transparan yang di dalamnya terdapat suspensi partikel padat, suspensi tersebut tampak keruh.

Apa itu nefelometri?

Dispersi radiasi oleh partikel dalam larutan

Pada saat berkas cahaya mengenai partikel zat tersuspensi, arah perambatan berkas berubah arah. Efek ini bergantung pada hal berikut:

1. Dimensi partikel (ukuran dan bentuk).

2. Karakteristik suspensi (konsentrasi).

3. Panjang gelombang dan intensitas cahaya.

4. Jarak cahaya insiden.

5. Sudut deteksi.

6. Indeks bias media.

Nefelometer

Nefelometer adalah alat yang digunakan untuk mengukur partikel tersuspensi dalam sampel cair atau gas. Jadi, fotosel yang ditempatkan pada sudut 90 ° ke sumber cahaya mendeteksi radiasi dari partikel yang ada dalam suspensi.

Selain itu, cahaya yang dipantulkan oleh partikel ke fotosel tergantung pada kepadatan partikel. Diagram 1 menyajikan komponen dasar yang membentuk nefelometer:

Gambar 1. Komponen dasar nefelometer.

UNTUK.

Dalam nefelometri, sangatlah penting untuk memiliki sumber radiasi dengan keluaran cahaya yang tinggi. Ada berbagai jenis, mulai dari lampu xenon dan lampu uap merkuri, lampu halogen tungsten, radiasi laser, dan lain-lain.

B.

Sistem ini terletak di antara sumber radiasi dan kuvet, sehingga dengan cara ini radiasi dengan panjang gelombang yang berbeda dibandingkan dengan radiasi yang diinginkan pada kuvet dapat dihindari.

Jika tidak, reaksi fluoresensi atau efek pemanasan dalam larutan akan menyebabkan penyimpangan pengukuran.

C.

Ini adalah wadah yang umumnya prismatik atau silinder, dan dapat memiliki ukuran yang berbeda. Ini adalah solusi yang diteliti.

D.

Detektor terletak pada jarak tertentu (umumnya sangat dekat dengan kuvet) dan bertugas mendeteksi radiasi yang dihamburkan oleh partikel dalam suspensi.

DAN.

Umumnya itu adalah mesin elektronik yang menerima, mengubah dan memproses data, yang dalam hal ini adalah pengukuran yang diperoleh dari studi yang dilakukan.

Penyimpangan

Setiap pengukuran memiliki persentase kesalahan, yang terutama diberikan oleh:

Kuvet yang terkontaminasi : di dalam kuvet, zat apa pun yang berada di luar larutan yang diteliti, baik di dalam maupun di luar kuvet, mengurangi pancaran cahaya dalam perjalanan menuju detektor (kuvet rusak, debu menempel pada dinding kuvet).

Gangguan : adanya kontaminan mikroba atau kekeruhan menyebarkan energi radiasi, meningkatkan intensitas dispersi.

Senyawa fluoresen : ini adalah senyawa yang, ketika dieksitasi oleh insiden radiasi, menyebabkan pembacaan kepadatan hamburan yang salah dan tinggi.

Penyimpanan Reagen : Suhu sistem yang tidak memadai dapat menyebabkan kondisi studi yang merugikan dan dapat menyebabkan adanya reagen yang keruh atau mengendap.

Fluktuasi daya listrik : untuk mencegah radiasi insiden menjadi sumber kesalahan, penstabil tegangan direkomendasikan untuk radiasi seragam.

Karakteristik metrologi

Karena kekuatan pancaran radiasi yang terdeteksi berbanding lurus dengan konsentrasi massa partikel, studi nefelometrik memiliki, secara teori, sensitivitas metrologi yang lebih tinggi daripada metode serupa lainnya (seperti turbidimetri).

Selanjutnya, teknik ini membutuhkan larutan encer. Hal ini memungkinkan fenomena penyerapan dan refleksi diminimalkan.

Aplikasi

Studi nefelometri menempati posisi yang sangat penting di laboratorium klinis. Aplikasinya mulai dari penentuan imunoglobulin dan protein fase akut, komplemen dan koagulasi.

Deteksi kompleks kekebalan

Ketika sampel biologis mengandung antigen yang diinginkan, itu dicampur (dalam larutan buffer) dengan antibodi untuk membentuk kompleks imun.

Nefelometri mengukur jumlah cahaya yang dihamburkan oleh reaksi antigen-antibodi (Ag-Ac), dan dengan cara ini kompleks imun dapat dideteksi.

Studi ini dapat dilakukan dengan dua metode:

Nefelometri Titik Akhir:

Teknik ini dapat digunakan untuk analisis titik akhir, di mana antibodi dari sampel biologis yang dipelajari diinkubasi selama dua puluh empat jam.

Kompleks Ag-Ac diukur menggunakan nephelometer dan jumlah cahaya yang tersebar dibandingkan dengan pengukuran yang sama yang dilakukan sebelum kompleks tersebut terbentuk.

Nefelometri kinetik

Dalam metode ini, laju pembentukan kompleks terus dipantau. Laju reaksi tergantung pada konsentrasi antigen dalam sampel. Di sini pengukuran dilakukan sebagai fungsi waktu, jadi pengukuran pertama dilakukan pada waktu "nol" (t = 0).

Nefelometri kinetik merupakan teknik yang paling banyak digunakan, karena penelitian dapat dilakukan dalam waktu 1 jam, dibandingkan dengan metode titik akhir dalam jangka waktu lama. Rasio dispersi diukur tepat setelah menambahkan reagen.

Oleh karena itu, selama reagen konstan, jumlah antigen yang ada dianggap berbanding lurus dengan laju perubahan.

Aplikasi lain

Nefelometri umumnya digunakan dalam analisis kualitas kimia air, untuk menentukan kejernihan dan untuk mengontrol proses pengolahannya.

Ini juga digunakan untuk mengukur polusi udara, di mana konsentrasi partikel ditentukan dari dispersi yang mereka hasilkan dalam cahaya insiden.

Referensi

1. Britannica, E. (nd). Nefelometri dan turbidimetri. Dipulihkan dari britannica.com
2. Al-Saleh, M. (nd). Turbidimetri & Nefelometri. Diperoleh dari pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (nd). Dipulihkan dari technochemical.com
4. Morais, IV (2006). Analisis Aliran Turbidimetri dan Nefelometri. Diperoleh dari repository.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Prinsip nefelometri dan turbidimetri. Dipulihkan dari notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Dasar-dasar Imunologi & Serologi. Albany, NY: Pembelajaran Thompson. Diperoleh dari books.google.co.ve
7. Wikipedia. (sf). Nefelometri (obat). Dipulihkan dari en.wikipedia.org