NUTRITIVE AGAR: ALASAN, PERSIAPAN DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2025

The nutrient agar adalah media nonselektif dan tidak ada budaya yang solid diferensial. Semua jenis bakteri yang tidak menuntut dari sudut pandang nutrisi tumbuh di media ini.

Media sederhana dan, terlepas dari namanya, mengandung nilai gizi yang lebih rendah dibandingkan dengan media sejenis lainnya, seperti Agar Infus Jantung Otak atau Agar Kedelai Trypticase.

Jumlah koloni pada nutrient agar

Kegunaannya di laboratorium sangat bervariasi. Ini terutama digunakan untuk subkultur spesies, memelihara strain, menghitung koloni, sebagai dasar untuk menyiapkan agar darah, antara lain.

Demikian pula, karena warnanya yang krem ​​terang, produksi pigmen yang dihasilkan oleh beberapa strain bakteri dapat dibedakan secara luar biasa, seperti pigmen kehijauan Pseudomonas aeruginosa, pigmen merah bata yang diproduksi oleh Serratia marcescens pada suhu kamar, pigmen kuning keemasan Staphylococcus. aureus, antara lain.

Selain itu, ini adalah salah satu media tanam termurah yang ada di pasaran.

Dasar

Seperti yang telah disebutkan di atas, ini adalah media yang sangat sederhana yang mengandalkan penyediaan nutrisi untuk pertumbuhan bakteri tanpa batasan dan tanpa reaksi kompleks untuk ditafsirkan.

Karena medianya tembus cahaya, sangat ideal untuk menghitung koloni dengan metode penyemaian kedalaman.

Komposisi

Ini terutama terdiri dari ekstrak daging atau ekstrak ragi, pepton atau gelatin pankreas, agar-agar, natrium klorida dan air suling.

Ekstrak daging atau ragi dan pepton merupakan sumber karbon dan mineral esensial (nitrogen, fosfor dan sulfur), yang akan digunakan oleh bakteri sebagai sumber energi dan faktor pertumbuhan.

Demikian juga agar-agar yang menjadi basis dari semua media kultur padat, menggantikan gelatin, yang merupakan senyawa basa pertama yang digunakan oleh Robert Koch untuk memberikan konsistensi padatan pada medianya.

Agar merupakan polisakarida yang tersusun dari galaktosa, galaktomanan, agarosa, dan agaropektin. Ini terbenam pada 40 ° C dan meleleh mendekati 100 ° C.

Pada bagiannya, natrium klorida menyediakan media dengan osmolaritas yang diperlukan untuk perkembangan bakteri.

Terakhir, air berfungsi untuk menghidrasi dan melarutkan senyawa terliofilisasi. Air suling yang disesuaikan dengan pH netral harus digunakan. Air keran sebaiknya tidak digunakan karena mengandung kalsium dan magnesium yang dapat bereaksi dengan fosfat dalam medium dan membentuk garam yang tidak larut.

Persiapan

Untuk satu liter nutrient agar, 31 g media dehidrasi harus ditimbang. Tempatkan dalam labu dan larut dalam satu liter air suling. Setelah 5 menit berdiri, panaskan di atas sumber panas dan aduk terus hingga mendidih selama 1 atau 2 menit.

Persiapan media kultur.

Labu kemudian ditempatkan dalam autoklaf dan disterilkan pada suhu 121 ° C selama 20 menit.

Sterilisasi dalam autoclave

Pada akhir waktu, itu dikeluarkan dari autoclave dan disajikan dalam cawan Petri steril, menggunakan penutup aliran laminar atau pembakar Bunsen.

Jika cawan petri dapat dibuang (plastik), media harus didistribusikan ketika agar-agar memiliki suhu sekitar 50 ° C, untuk mencegah agar tidak berubah bentuk karena panas yang berlebihan.

Biarkan mengeras dan simpan pada dudukan pelat terbalik dan dinginkan pada suhu 2-8 ° C sampai digunakan.

Piring harus diaduk sebelum diunggulkan. Piring agar-agar nutrisi tidak boleh digunakan jika terkontaminasi atau dehidrasi.

PH media yang disiapkan harus disesuaikan menjadi 7,3 ± 0,2.

Aplikasi

Ini adalah media kultur paling sederhana yang digunakan di laboratorium mikrobiologi. Formulasinya sangat baik untuk pertumbuhan bakteri non-permintaan.

Kegunaan utamanya dijelaskan di bawah ini:

Sebagai dasar pembuatan agar darah

Media ini kadang-kadang digunakan sebagai bahan dasar untuk membuat agar darah, namun ini bukan bahan dasar yang paling umum digunakan.

Merangsang sporulasi bakteri pembentuk spora

Media kultur ini sangat berguna untuk merangsang sporulasi bakteri pembentuk spora seperti Bacillus sp.

Untuk ini, strain dari genus Bacillus disemai dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 ° C dalam aerobiosis. Setelah koloni tumbuh, piring mengalami tekanan suhu, yaitu suhu oven dinaikkan menjadi 44 ° C dan dibiarkan selama 24 jam atau ditempatkan di lemari es selama 24 jam.

Pada akhir waktu, noda kultur dibuat dan diwarnai dengan pewarnaan Gram atau dengan pewarnaan spora Shaeffer-Fulton. Basilus dengan endospora (spora di dalam basil) dan eksospora (spora di luar basil) akan diamati di dalamnya.

Perawatan regangan

Beberapa laboratorium pendukung penelitian atau pengajaran universitas memerlukan pemeliharaan bakteri yang layak secara klinis selama mungkin, untuk menggunakan bank bakteri (bacterioteca) untuk pekerjaan penelitian atau untuk persiapan praktik pengajaran, di mana Siswa akan belajar memanipulasi dan mengidentifikasi mikroorganisme tersebut.

Agar nutrisi, serta agar infus jantung otak, dapat digunakan untuk tujuan ini. Agar-agar disiapkan, dituang ke dalam tabung dengan tutup bakelite dan dimiringkan pada alasnya sedemikian rupa sehingga agar-agar tersebut mengeras membentuk balok di bagian bawah dan miring di permukaan (paruh seruling).

Setiap tabung diberi label dengan nama bakteri yang akan diunggulkan dan tanggalnya. Setiap bakteri akan disemai di bevel dan diinkubasi selama 24 jam, setelah koloni tumbuh, tabung disimpan pada suhu kamar.

Bakterioteca harus diperbarui dari 1 sampai 3 bulan, untuk menghindari kontaminasi dan dehidrasi pada media serta kematian bakteri.

Hanya bakteri yang tidak pilih-pilih yang dapat dipertahankan dengan cara ini.

Jumlah koloni

Meskipun ada cara khusus untuk menghitung koloni, seperti agar hitung standar, agar nutrien dapat digunakan untuk tujuan ini, baik dengan penyemaian permukaan dengan spatula drigalski atau dengan kedalaman. Untuk alasan ini sangat berguna dalam analisis mikrobiologi makanan dan air.

Menjalankan tes diagnostik

Karena ini adalah media yang tidak mengandung darah, atau zat aditif lainnya, sangat ideal untuk mengambil koloni yang tumbuh pada media ini untuk melakukan uji katalase.

Demikian pula, karena warnanya yang terang, diindikasikan untuk melakukan uji oksidase langsung pada area agar-agar berbiji, tanpa gangguan.

Pemulihan aerob mesofilik dari air asin rekreasi (Pantai)

Nutrisi agar yang dibuat dengan 10% air laut berguna untuk evaluasi aerob mesofilik di perairan pantai.

Dengan cara ini, tingkat kontaminasi nyata yang dimiliki air dengan mikroorganisme ini dapat diketahui, karena pada jenis sampel ini hasilnya tumpang tindih ketika media kultur yang disiapkan dengan cara konvensional digunakan.

Ini ditunjukkan oleh Cortez et al. pada 2013 dalam sebuah penelitian.

Hal ini dapat dijelaskan karena perubahan mendadak yang dialami bakteri saat berpindah dari lingkungan hipersal ke lingkungan rendah garam, oleh karena itu mikroorganisme memasuki keadaan lesu di mana mereka dapat hidup, tetapi tidak dapat dibudidayakan.

Referensi

1. "Agar nutrisi." Wikipedia, ensiklopedia gratis. 13 Sep 2016, 20:33 UTC. 29 Des 2018, 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Editorial Panamericana SA
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologis. (Edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana SA
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Pengaruh media kultur yang disiapkan dengan air laut pada indikator kesehatan di perairan laut spa di Chichiriviche, negara bagian Falcón, Venezuela. Pendeta Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M dan Cardoso M. Kualitas mikrobiologis air untuk dosis inseminasi, untuk babi. Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Mikrobiologi klinis praktis. University of Cadiz, edisi ke-2. Layanan Publikasi UCA.