KULTUR BAKTERI: JENIS, KARAKTERISTIK, METODE, PERSYARATAN - BIOLOGI - 2025

Sebuah kultur bakteri adalah hasil dari pembenihan mikroorganisme tersebut pada media nutrisi, agar mereka untuk mereproduksi, yang mengakibatkan munculnya koloni bakteri di media padat dan kekeruhan pada media cair.

Metode penaburan sangat penting untuk dapat mendistribusikan inokulum sedemikian rupa sehingga bakteri yang ada tersebar dan dapat mengembangkan koloni yang terisolasi dengan baik.

Aneka tanaman ditanam penulis di Laboratorium Bakteriologi Gedung Ilmu Biomedis dan Teknologi Universitas Carabobo. Sumber: komposisi foto yang diambil oleh penulis MSc. Marielsa Gil.

Koloni yang diperoleh dalam media kultur padat merupakan hasil perkembangbiakan mikroorganisme yang dibibitkan. Setiap koloni dimulai dari satu bakteri, yang dapat berkembang biak secara eksponensial untuk membentuk populasi yang terlihat secara makroskopis.

Hal yang sama terjadi pada media kultur cair tetapi dalam hal ini pertumbuhan bakteri diamati dari kekeruhan.

Pertumbuhan bakteri dimungkinkan jika media kultur yang dipilih memenuhi kondisi nutrisi dan pH yang diperlukan untuk perkembangan bakteri tertentu. Selain itu, perlu juga dilakukan kontrol terhadap variabel lain seperti suhu, waktu inkubasi, konsentrasi oksigen, CO ₂ , dan lain-lain.

Tidak semua populasi bakteri membutuhkan persyaratan yang sama, meskipun beberapa mungkin umum untuk hampir semua, seperti medianya mengandung pepton, benar juga bahwa ada lebih banyak mikroorganisme yang membutuhkan tambahan zat khusus lainnya, yang disebut faktor pertumbuhan.

Sebagai contoh, dapat disebutkan bahwa beberapa Haemophilus membutuhkan keberadaan faktor X (hemin) dan faktor V (NAD) untuk tumbuh.

Jenis kultur bakteri

Kultur bakteri dapat berupa polimikroba, murni atau campuran.

Kultur bakteri polimikroba

Kultur polimikroba adalah kultur yang berasal dari penaburan sampel yang diperoleh dari tempat yang memiliki mikrobiota normal, di mana patogen tertentu juga dapat ditemukan.

Contoh: saat mengembangkan kultur usap tenggorokan, patogen seperti Streptococcus pyogenes dapat ditemukan, tetapi akan disertai oleh mikrobiota umum di daerah tersebut.

Dalam hal ini, striasi yang baik sangat penting yang memungkinkan pertumbuhan berbagai jenis bakteri yang ada dalam isolasi.

Koloni yang memiliki karakteristik yang sesuai dengan strain Streptococcus pyogenes akan disentuh dengan hati-hati dengan loop platinum dan kemudian ditanam dalam media kultur yang masih asli dan dengan demikian mendapatkan kultur murni dari mikroorganisme tersebut.

Dari kultur murni ini, semua tes yang diperlukan untuk mengidentifikasi bakteri dapat dilakukan.

Kultur bakteri murni

Untuk mengidentifikasi mikroorganisme secara efisien, seseorang harus bekerja dari kultur murni.

Kultur murni dapat diperoleh seperti pada contoh sebelumnya dengan menanam kembali koloni terisolasi dari kultur polimikroba, atau ketika sampel yang berasal dari tempat yang biasanya steril ditanam dan hanya ada satu patogen (pertumbuhan satu jenis bakteri). Contoh: ketika CSF diunggulkan dari pasien dengan meningitis bakterial.

Cara lain adalah dengan menumbuhkan kembali dari budaya murni lama untuk mendapatkan budaya murni yang diperbarui.

Kultur bakteri campuran

Kultur ini terdiri dari campuran mikroorganisme, seperti yang terjadi di alam. Dalam beberapa proses industri, penggunaan kultur campuran mudah dilakukan.

Ini dapat diperoleh melalui penyatuan beberapa kultur murni, karena ini memungkinkan studi keterkaitan bakteri.

Mereka berguna, misalnya, dalam degradasi xenobiotik dalam air limbah industri, karena mereka bertindak sebagai agen yang dapat terurai secara hayati.

Karakteristik kultur bakteri

Ciri morfologi koloni yang diperoleh dalam kultur bakteri bisa sangat bervariasi.

Koloni bisa sangat kecil, sedang, atau besar dan mungkin tampak kering atau berlendir, berkilau atau kusam. Tergantung pada teksturnya, dapat bervariasi antara halus dan kasar dan, tergantung pada bentuknya, bisa melingkar, datar, cembung.

Tergantung pada warnanya: tidak berwarna, putih, kuning, merah muda, fuchsia, merah, oranye, krem, keabu-abuan, kehijauan, coklat, hitam atau dengan kilau logam, tergantung pada bakteri yang terlibat dan media kultur yang digunakan.

Perbatasan koloni bisa teratur atau tidak beraturan. Orang lain, di sisi lain, mungkin menampilkan film seragam yang didistribusikan di hampir seluruh media yang disebut "swarming". Ini adalah karakteristik Proteus sp.

Beberapa kultur bakteri mengeluarkan bau yang cukup khas dari spesies yang terlibat. Misalnya, biakan Pseudomonas aeruginosa memiliki bau buah yang khas, sedangkan genus Proteus memiliki bau busuk yang khas.

Contoh koloni menurut ukurannya

Sangat kecil: Mycoplasma pneumoniae, Francisella tularensis.

Kecil: Streptococcus sp, Enterococcus sp.

Sedang: Keluarga Enterobacteriaceae

Besar: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa.

Contoh koloni menurut penampilannya

Kering: Lactobacillus confusus.

Mukoid: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Cemerlang: Klebsiella pneumoniae.

Buram: Enterococcus faecalis, beberapa strain Neisseria gonorrhoeae.

Contoh koloni menurut teksturnya

Koloni halus: Micrococcus luteus

Koloni kasar: Sarcina ventriculi pada nutrient agar.

Contoh koloni menurut bentuknya

Edaran: Listeria murrayi dan Micrococcus luteus pada nutrient agar.

Datar: Staphylococcus equorum pada nutrient agar.

Cembung: Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae.

Contoh koloni menurut perbatasannya

Tepi membulat: Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

Batas tidak beraturan: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Tepi lobed: Bacillus sp.

Contoh koloni menurut warnanya

Transparan atau tidak berwarna: Shigella sp pada agar XLD.

Putih: Staphylococcus hominis pada agar darah.

Beige: Bacillus sphaericus dan Lactobacillus confusus pada nutrient agar.

Kuning: Staphylococcus aureus dan Elizabethkingia meningoseptica pada agar darah, Pediococcus sp, Staphylococcus lentus pada nutrient agar,

Merah muda: Escherichia coli pada agar XLD, Micrococcus roseus pada nutrient agar.

Fuchsia: Escherichia coli pada Mac Conkey agar.

Violet: Chromobacterium violaceum.

Kemerahan: Serratia marcescens pada suhu kamar pada nutrient agar.

Oranye: Kurthia zopfii pada nutrient agar.

Keabu-abuan: Sporosarcina ureae dalam agar ekstrak tanah.

Kehijauan: Pseudomonas aeruginosa pada agar BHI.

Coklat: Enterococcus sp pada empedu esculin agar.

Hitam: Salmonella enteritidis pada agar SS.

Dengan kilau logam: Escherichia coli pada Endo agar.

Metode kultur bakteri

Kultur bakteri aerob atau anaerob fakultatif

Ini adalah metode budidaya yang paling banyak digunakan. Hal ini karena, pertama-tama, sebagian besar bakteri patogen bagi manusia adalah anaerobik aerob atau fakultatif; dan kedua, ini jauh lebih murah dan lebih mudah daripada biakan anaerobik. Contoh: masing-masing Mycoplasma pneumoniae dan Escherichia coli.

Kultur bakteri anaerobik

Jenis kultur ini membutuhkan penekanan oksigen lengkap. Media kultur untuk bakteri anaerob umumnya harus mengandung zat pereduksi seperti: asam askorbat, tioglikolat, sistein, atau belerang untuk menghilangkan efek racun dari oksigen di udara.

Beberapa mengandung indikator seperti resazurin yang berwarna biru dengan adanya oksigen dan tidak berwarna pada anaerobiosis. Contoh: Clostridium tetani.

Kultur bakteri pada mikroaerofilia

Pelat kultur ditempatkan dalam sungkup mikroaerofilik dengan lilin yang menyala, ditutup. Lilin menghabiskan oksigen dan padam. Pada kondisi ini tumbuh beberapa bakteri, seperti Streptococcus sp.

Bahan dan persyaratan

bahan

Bahan yang dibutuhkan untuk melakukan kultur bakteri adalah: Cawan atau tabung petri dengan media kultur atau kaldu, loop platina, sample, bunsen burner atau oven.

Persyaratan untuk melakukan kultur bakteri

Pembudidayaan bakteri membutuhkan banyak unsur yang harus diperhatikan, seperti unsur hara dalam medium, pH, suhu, konsentrasi oksigen, CO2, kelembaban, dan lain-lain.

Nutrisi

Kultur bakteri membutuhkan media kultur yang mengandung unsur makro dan mikro. Diantara unsur makro dapat disebutkan zat organik seperti pepton, asam amino, karbohidrat sebagai sumber karbon dan nitrogen.

Di antara unsur mikro tersebut adalah zat anorganik atau elemen jejak mangan, seng, nikel, boron, klorin, selenium, silikon, kobalt, tembaga, dan lain-lain.

Konsentrasi ion hidrogen (pH)

Konsentrasi ion hidrogen (H ⁺ ) dan ion hidroksil (OH ^- ) dalam media tempat kultur akan berkembang sangat penting, karena ini menentukan pH.

PH yang paling umum digunakan adalah netral (pH = 7.0), namun mungkin ada media yang memungkinkan pH asam atau basa, misalnya jika Anda ingin mengisolasi masing-masing bakteri asidofilik atau alkalifil.

Suhu

Suhu merupakan faktor yang sangat penting yang mempengaruhi pertumbuhan kultur bakteri. Bakteri dapat bersifat psikrofilik (tumbuh pada suhu <20 ° C, mesofilik (antara 20 ° C dan 42 ° C), termofilik (40 ° C hingga 70 ° C), hipertermofilik (70 ° C - 105 ° C).

Kebutuhan oksigen

Aerobik: mereka tumbuh dengan adanya oksigen.

Mikroaerofilik: mereka tumbuh dengan adanya 5-10% CO _2.

Anaerob ketat: tumbuh tanpa adanya oksigen.

Anaerob fakultatif: tumbuh dengan adanya oksigen atau tanpa oksigen.

Aerotolerant: mereka tumbuh dengan baik tanpa oksigen dan mentolerir sedikit oksigen.

Media budaya

Media kultur adalah sediaan nutrisi khusus yang disiapkan di laboratorium untuk mendapatkan pertumbuhan atau kultur mikroba. Media ini bervariasi dalam hal konsistensi, komposisi, dan fungsi. Setiap laboratorium akan menyiapkan jenis media kultur yang sesuai dengan kebutuhannya.

Koleksi kultur bakteri

Ada lembaga atau organisasi yang didedikasikan untuk pengumpulan, karakterisasi, pemeliharaan, dan distribusi strain bakteri yang penting secara klinis, lingkungan, atau industri.

Strain ini digunakan untuk pekerjaan penelitian dan untuk melakukan kontrol kualitas pada media kultur.

Contoh: strain American Type Culture Collection, Venezuelan Center for Collection of Microorganisms (CVCM) dan strain National Institute of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba (INHEM), antara lain.

Referensi

1. Benavides G, Hermida A. Isolasi dan identifikasi flora bakterial asli dari tanah Cruz Verde dan Guasca páramos. (Cundinamarca). 2008. Bogotá. Tersedia di: javeriana.edu.co/biblos
2. Hans S. Umum Mikrobiologi. Edisi Omega. 1991. Barcelona, ​​Spanyol. Tersedia dalam: biolprocariotas.files
3. Weng Z, Junco R, Díaz R.Kumpulan kultur mikroba: Catatan tentang perkembangannya. Rev Cubana Hig Epidemiol, 2003; 41 (1). Tersedia di: scielo.sld.cu/scielo.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologis. Edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.