BIRU LAKTOFENOL: KARAKTERISTIK, KOMPOSISI, PERSIAPAN, PENGGUNAAN - KIMIA - 2024

The Lactophenol biru atau katun biru disiapkan dengan sifat pewarna tunggal. Ini digunakan di laboratorium klinis untuk terutama mewarnai struktur jamur seperti hifa, tabung kuman dan spora.

Ini membantu dalam diagnosis dugaan atau pendahuluan dari jamur tertentu, namun selalu disarankan untuk memperkuat diagnosis dengan tes yang lebih spesifik, seperti tes biokimia atau serologis.

Representasi grafis dari noda biru laktofenol, apusan diwarnai dengan biru laktofenol, preparasi yang dipasang di mikroskop. Sumber: Public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Biru laktofenol terdiri dari asam laktat, biru anilin, gliserin, fenol, dan air deionisasi. Ini bisa disiapkan di laboratorium atau bisa dibeli siap pakai. Setelah disiapkan, siap digunakan, dalam keadaan apa pun tidak boleh diencerkan, karena tindakan ini akan memberikan hasil yang buruk.

Konsentrasi komponennya membuatnya ideal untuk pewarnaan struktur jamur, karena fenol menghilangkan mikrobiota bakteri yang menyertainya, sedangkan asam laktat menghasilkan lapisan pelindung di sekitar struktur jamur. Terakhir, aniline blue memiliki afinitas untuk melekat pada struktur jamur.

Dasar

Dengan biru laktofenol, pewarnaan sederhana pada struktur jamur dari kultur mikologi tertentu dilakukan. Disebut simple karena hanya menggunakan satu zat pewarna.

Biru laktofenol, selain pewarnaan, juga bertindak sebagai penjelas sampel, berkat aksi bersama asam laktat dan fenol, selain itu, fenol berperilaku sebagai mordan dan pada saat yang sama mencegah lisis mikroorganisme dengan menghambat enzim hidrolitik yang mungkin hadir.

Sedangkan asam laktat menjaga morfologi struktur jamur.

Di sisi lain, biru anilin memiliki sifat menempel atau mengikat pada struktur yang mengandung kitin. Strukturnya diwarnai biru muda.

Perlu diperhatikan bahwa dinding sel mikroorganisme jamur, terutama kapang, mengandung kitin, oleh karena itu pewarna ini sangat ideal untuk pewarnaan mikroorganisme tersebut.

karakteristik

Larutan biru laktofenol adalah pewarna yang sangat asam, agak keruh, berair dengan warna biru muda. Itu tetap stabil jika disimpan antara 15 ° C dan 25 ° C. Botol harus disimpan dengan benar. Ini mengiritasi dan korosif pada kulit dan selaput lendir.

Komposisi

Rumus pembuatan satu liter laktofenol biru adalah sebagai berikut:

-250 g / L asam laktat

-1,0 g / L anilin biru atau biru metil

-500 g / L gliserin

-250 g / L. fenol

-250 ml air deionisasi atau suling.

Fenol dilarutkan dalam air yang sebelumnya dihangatkan. Asam laktat dan gliserin ditambahkan dan dicampur dengan baik. Akhirnya, biru anilin larut. Ini bercampur lagi dan siap digunakan.

Porsi untuk menyiapkan 80 ml larutan biru laktofenol adalah:

-20 g kristal fenol

-20 ml asam laktat

-40 ml gliserin atau gliserol

-20 ml air suling.

Menggunakan

Ini digunakan untuk mewarnai struktur jamur dan, melalui karakteristik morfologi yang diamati pada tingkat mikroskopis, untuk dapat membuat diagnosis dugaan jamur.

Proses

Pewarnaan struktur jamur kultur

- Ambil kultur murni dari jamur yang strukturnya akan diamati.

- Lebih disukai bekerja di dalam tudung aliran laminar, atau di bawah pemantik api, menggunakan masker dan sarung tangan, karena harus mematuhi standar biosekuriti, karena kebanyakan jamur mudah menyebar di lingkungan dan oleh karena itu menimbulkan bahaya untuk operator.

- Setetes laktofenol biru ditempatkan pada slide.

- Potong selotip kecil dari pita perekat berkualitas baik dan tempelkan dengan hati-hati ke ujung pegangan platina dingin yang disterilkan.

- Pegangan platina didekatkan ke bagian paling dangkal dari koloni jamur dan kultur disentuh dengan sangat hati-hati, tepat di tempat pita perekat berada.

- Kemudian dibawa ke slide dan ditempatkan tepat di setetes laktofenol biru, berhati-hati agar selotip diperpanjang sempurna dan dilumasi dengan pewarna. Pegangan platina dilepas dengan sangat hati-hati.

- Setetes laktofenol biru ditempatkan pada selotip dan penutup di atas. Jangan menekan terlalu banyak untuk menghindari kerusakan struktur jamur, karena ini sangat rapuh. Pewarna harus dibiarkan bekerja selama kurang lebih 3 sampai 4 menit.

- Setelah itu sediaan siap diamati di bawah mikroskop dengan perbesaran 10X atau 40X. Jika pengamatan 100X diperlukan, minyak imersi harus digunakan.

- Struktur cendawan pada umumnya diwarnai biru, kecuali fungi dematiaceous yang akan mempertahankan warna coklat khasnya dari jenis cendawan ini.

Pewarnaan spesimen biologis langsung

Jika perlu mempelajari sampel biologis langsung, seperti dahak, nanah, eksudat, sekret, dan lain-lain, perlu ada prosedur dekontaminasi sampel sebelumnya. Larutan NaOH digunakan untuk ini.

Dalam kasus sampel rambut ini dapat diwarnai secara langsung.

Beberapa rambut yang terkena (total 10) diambil dari lesi tinea kapitis yang diduga (area alopecic) dan ditempatkan pada slide (3 hingga 4 rambut per slide). Beberapa tetes laktofenol biru ditempatkan di atasnya dan segera ditutup dengan penutup mata.

Pegang kaca objek dengan penjepit dan panaskan perlahan di atas kompor. Untuk melakukan ini, buat 3 hingga 4 lintasan cepat melalui nyala api. Amati mikroskop pada 40X dan cari spora di luar atau di dalam rambut (masing-masing ectothrix atau endothrix). Jika perlu tambahkan minyak imersi dan amati pada 100X.

Pewarnaan tabung kuman dalam identifikasi

Setelah menginkubasi kultur dugaan Candida albicans dalam serum manusia selama 2 sampai 4 jam pada suhu 37 ° C, sebagian larutan diambil dan diwarnai dengan biru laktofenol. Persiapan diamati di bawah mikroskop pada 40X. Ada tabung kuman dan blastospora berwarna biru cerah.

Lembar Data Keamanan Lactophenol

National Fire Protection Association (NFPA), menetapkan lembar data keselamatan bahan kimia dalam hal risiko yang diwakilinya menurut berbagai aspek, dilambangkan dengan belah ketupat berwarna dan angka mulai dari 0- Empat.

Bahaya kesehatan diidentifikasi dengan warna biru, warna merah mudah terbakar, ketidakstabilan atau reaktivitas dalam warna kuning, dan bahaya khusus lainnya berwarna putih.

Kesehatan

Risiko kesehatan yang ditimbulkan oleh lactophenol blue menurut NFPA adalah pada level 3. Artinya zat tersebut sangat berbahaya jika tertelan atau bersentuhan langsung dengan kulit atau mukosa.

Ini adalah zat yang sangat korosif dan mengiritasi.

Jika terkena kulit dan selaput lendir dapat menyebabkan luka bakar yang parah.

Jika tertelan dapat menyebabkan sakit kepala, kebingungan, kelesuan, pingsan, henti napas dan bahkan kematian.

Perangsangan

Menurut NFPA, Lactophenol Blue memiliki peringkat Level 1 untuk sifat mudah terbakar. Artinya, ia hanya terbakar jika dipanaskan di atas 94 ° C.

Ketidakstabilan

Tercantum menurut NFPA pada level 0 (nol) dalam hal reaktivitas. Ini berarti bahwa ia tidak memiliki risiko reaktivitas, yaitu zat yang stabil secara kimiawi.

Bahaya khusus

Tidak ada bahaya khusus tambahan.

Referensi

1. Laboratorium SAR. Lactophenol Blue. 2010. Tersedia di: labsar.com.
2. Laboratorium kimia klinis terapan. Biru laktofenol. 2015. Tersedia di: cromakit.es
3. Laboratorium Merck. Mikroskopi biru laktofenol dalam larutan. 2017. Tersedia di: Users / Equipo / Downloads
4. Kartu Darurat. Larutan biru laktofenol untuk pewarnaan jamur. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Kolombia. 2014. Tersedia di: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Teknik pewarnaan struktur jamur dengan pewarna nabati sebagai alternatif non-polusi. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Tersedia di: Redalyc.
6. Laboratorium Himedia. Lactophenol Cotton Blue. 2017. Tersedia dari: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Aktor J, Dasgupta A. Tes Biokimia dan Teknik Pewarnaan untuk Identifikasi Mikroba. Science Direct, 2017; 61-73. Tersedia dari: Elsevier