- Sejarah
- Untuk apa reagen Benediktus?
- Deteksi glukosa dalam urin
- Pewarnaan solusi
- Deteksi berbagai monosakarida dan disakarida
- Komponen
- Prosedur penggunaan
- Reaksi uji Benediktus
- Persiapan reagen Benediktus
- Referensi
The Benediktus 's reagen adalah solusi tembaga biru yang digunakan untuk mendeteksi keberadaan gula pereduksi: aldehida, keton alpha-hydroxy dan hemiketals. Ini dikembangkan oleh Stanley R. Benedict (1884-1936).
Gula alfa-hidroksi-keton dicirikan dengan adanya gugus hidroksil di sekitar keton. Sedangkan hemiketal merupakan senyawa hasil penambahan alkohol ke dalam aldehida atau keton. Reagen Benediktus bereaksi tanpa pandang bulu dengan semua gula pereduksi ini.
Pewarnaan tabung reaksi setelah menambahkan reagen Benedict memungkinkan kita mengetahui secara semi-kuantitatif berapa banyak gula pereduksi yang terlarut. Sumber: Thebiologyprimer
Metode Benedict didasarkan pada aksi reduksi gula pada Cu 2+ , yang berwarna biru, yang mengubahnya menjadi Cu + . Cu + membentuk endapan berwarna merah bata dari tembaga oksida. Namun, bergantung pada konsentrasi gula, spektrum warna muncul (gambar atas).
Perhatikan bahwa jika reagen Benedict ditambahkan ke tabung reaksi tanpa gula pereduksi (0%), ia tidak mengalami perubahan warna kebiruan. Jadi, bila konsentrasinya lebih tinggi dari 4%, tabung reaksi akan berwarna coklat.
Sejarah
Reagen ini dibuat oleh ahli kimia Amerika Stanley Rossiter Benedict pada tahun 1909, yang menerbitkan artikel ilmiahnya Reagen A untuk deteksi gula pereduksi, dalam jurnal J. Biol. Chem.
Selanjutnya Lewis dan Benedict (1915) mempublikasikan metode penentuan reduksi gula dalam darah, menggunakan picrate sebagai indikatornya; tetapi dihentikan karena kurangnya spesifisitas.
Reagen Benediktus sangat mirip dengan Fehling. Mereka berbeda karena Benediktus menggunakan ion sitrat dan garam natrium karbonat; sedangkan Fehling menggunakan ion tartrat dan natrium hidroksida.
Tes Benediktus bersifat kualitatif, yaitu hanya mendeteksi keberadaan gula pereduksi. Namun, reagen Benedict dapat bersifat kuantitatif jika memiliki kalium tiosianat dalam larutan, yang membentuk endapan putih tiosianat tembaga yang dapat dititrasi menggunakan standar glukosa.
Untuk apa reagen Benediktus?
Deteksi glukosa dalam urin
Reagen Benediktus masih digunakan untuk mendeteksi keberadaan glukosa dalam urin dan merupakan indikasi penyakit diabetes pada pasien, yang urinnya akan menjalani tes Benediktus. Meskipun, tidak dapat disangkal bahwa glukosuria memiliki asal yang berbeda.
Misalnya, peningkatan glikosuria ditemukan pada kondisi seperti: kehamilan, glikosuria ginjal primer, asidosis tubulus ginjal, sindrom Fanconi primer atau sekunder, hiperaldosteronisme, dan pankreatitis akut atau kanker pankreas.
Reagen Benediktus berwarna biru karena adanya Cu 2+ , yang direduksi menjadi Cu + dengan aksi gula reduksi; dalam hal ini, glukosa, membentuk endapan tembaga (I) oksida berwarna merah bata.
Pewarnaan solusi
Pewarnaan dan pembentukan endapan dalam uji Benediktus yang diterapkan pada urin bervariasi tergantung pada konsentrasi gula reduksi. Jika konsentrasi glukosa dalam urin kurang dari 500 mg / dL, larutan berubah menjadi hijau dan tidak ada pembentukan endapan.
Konsentrasi glukosa dalam urin 500-1000 mg / dL menyebabkan endapan hijau pada uji Benediktus. Pada konsentrasi yang lebih besar dari 1.000 sampai 1.500 mg / dL menyebabkan terbentuknya endapan berwarna kuning.
Jika konsentrasi glukosa 1.500 - 2.000 mg / dL akan terlihat endapan berwarna jingga. Konsentrasi glukosa dalam urin yang lebih besar dari 2.000 mg / dL akan menyebabkan terbentuknya endapan berwarna merah bata.
Hal ini menunjukkan bahwa tes Benediktus bersifat semi kuantitatif dan hasilnya dilaporkan dengan menggunakan persilangan. Jadi, misalnya, pembentukan endapan hijau sesuai dengan tanda silang (+); dan pembentukan endapan bata merah, sesuai dengan empat salib (++++).
Deteksi berbagai monosakarida dan disakarida
Reagen Benedict mendeteksi adanya gula pereduksi yang memiliki gugus fungsi bebas atau gugus fungsi keton bebas, sebagai bagian dari struktur molekulnya. Ini adalah kasus untuk glukosa, galaktosa, manosa dan fruktosa (monosakarida), serta laktosa dan maltosa (disakarida).
Sukrosa dan pati tidak bereaksi dengan pereaksi Benediktus karena mereka memiliki gugus pereduksi bebas. Selain itu, ada senyawa yang mengganggu tes Benediktus dalam urin, memberikan kepositifan palsu; seperti kasus salisilat, penisilin, streptomisin, levodopa, asam nalidiksat dan isoniazid.
Ada bahan kimia yang ada dalam urin yang dapat mengurangi reaksi Benediktus; misalnya: kreatinin, urat, dan asam askorbat.
Komponen
Komponen reagen Benedict adalah sebagai berikut: tembaga sulfat pentahidrat, natrium karbonat, trisodium sitrat, dan air suling.
Tembaga sulfat pentahidrat, CuSO 4 · 5H 2 O, mengandung Cu 2+ : senyawa inilah yang memberi warna biru pada reagen Benediktus. Gula pereduksi bekerja pada Cu 2+ , menyebabkan reduksi menjadi Cu + dan pembentukan endapan merah bata dari tembaga oksida (Cu 2 O).
Sodium karbonat menghasilkan media basa, yang diperlukan untuk reduksi tembaga berlangsung. Sodium karbonat bereaksi dengan air, menghasilkan natrium bikarbonat dan ion hidroksil, OH - , yang bertanggung jawab atas alkalinitas media yang diperlukan untuk terjadinya proses reduktif.
Sodium sitrat membentuk kompleks dengan tembaga (II) yang mencegahnya mengalami reduksi menjadi Cu (I) selama penyimpanan.
Prosedur penggunaan
5 mL reagen Benedict dimasukkan ke dalam tabung reaksi berukuran 20 x 160 mm dan ditambahkan 8 tetes urin. Tabung reaksi dikocok perlahan dan ditempatkan dalam wadah berisi air mendidih selama 5-10 menit.
Setelah itu, tabung dikeluarkan dari penangas air panas dan permukaannya didinginkan dengan air mengalir hingga akhirnya ada pembacaan hasil yang diperoleh saat melakukan uji Benediktus (warna).
Reaksi uji Benediktus
Reduksi Cu (II) selama tes Benediktus dapat dibuat skema sebagai berikut:
RCHO + 2 Cu 2+ (dalam kompleks) + 5 OH - => RCOO - + Cu 2 O + 3 H 2 O
RCHO = aldehida; RCOO - = (ion karboksilat); Cu 2 O = cuprous oxide, endapan berwarna merah bata.
Persiapan reagen Benediktus
173 gram natrium sitrat dan 100 gram natrium karbonat ditimbang dan dilarutkan bersama dalam 800 mL air suling hangat. Jika jejak zat yang tidak larut diamati, larutan harus disaring.
Sebaliknya, 17,3 gram cupric sulfate pentahydrate dilarutkan dalam 100 mL akuades.
Selanjutnya, dua larutan berair dicampur perlahan dan pengadukan terus menerus dilanjutkan, membuat hingga 1.000 mL dengan air suling.
Referensi
- Graham Solomons TW, Craig B. Fryhle. (2011). Kimia organik. Amina. ( Edisi ke 10. ). Wiley Plus.
- Clark J. (2015). Oksidasi aldehida dan keton. Diperoleh dari: chemguide.co.uk
- Wikipedia. (2020). Reagen Benediktus. Dipulihkan dari: en.wikipedia.org
- Tim editorial. (9 Januari 2019). Tes Benediktus: Prinsip, Persiapan Reagen, Prosedur dan Interpretasi. Diperoleh dari: Laboratoryinfo.com
- Dr. Whitson. (sf). Reagen Benediktus: Tes untuk Mengurangi Gula. Diperoleh dari: nku.edu