- Fondasi dan bahan
- bahan
- Langkah
- Pemeriksaan makroskopis dan mikroskopis
- Teknik Faust Asli
- Teknik Faust dengan sentrifugasi
- Keuntungan
- Kekurangan
- Referensi
The Teknik Faust adalah metodologi yang memungkinkan konsentrasi beberapa telur dan / atau larva parasit yang terdapat pada tinja oleh mengambang. Ini digunakan ketika tes koproparasitologis langsung negatif atau ketika Anda ingin mendapatkan sampel bersih yang bebas dari detritus.
Metode konsentrasi untuk pemeriksaan koproparasitologi ada tiga jenis: dengan flotasi, dengan sedimentasi atau dengan metode yang menggabungkan dua metode sebelumnya. Metode ini meningkatkan kemungkinan hasil yang positif.
Analisis feses.
Metode Faust terdiri dari mencampurkan bagian sampel tinja dengan zat yang lebih padat daripada telur atau parasit yang akan dipekatkan. Ini menyebabkan, karena kurang padat, mereka mengapung di permukaan. Cairan supernatan dikumpulkan dan dilihat di bawah mikroskop untuk identifikasi dan kuantifikasi.
Metode ini digunakan untuk memvisualisasikan telur cacing. Pada saat yang sama, ini telah terbukti menjadi metode yang sangat sensitif untuk mendiagnosis Giardia lamblia, protozoa flagellated yang tersebar luas di seluruh dunia. Metode flotasi tidak disarankan untuk telur parasit yang sangat berat seperti cacing pita dan trematoda.
Parasit adalah salah satu infeksi usus yang paling tersebar luas di seluruh dunia, terutama di negara-negara miskin dengan tindakan sanitasi yang buruk. Untuk alasan ini, memiliki metode sensitif untuk mengidentifikasi dan mengukur parasit ini sangat berguna untuk diagnosis dan pengobatan.
Fondasi dan bahan
Teknik ini didasarkan pada adanya perbedaan berat jenis telur, parasit, kista, larva dan detritus, menggunakan larutan seng sulfat sebagai metode flotasi.
Dasar pemikiran dari teknik ini adalah mencampur sampel dengan larutan seng sulfat yang memiliki kepadatan lebih tinggi daripada telur, larva, atau parasit yang lebih ringan.
Hal ini memungkinkan elemen yang lebih berat mengendap dan elemen yang lebih ringan mengapung yang muncul di supernatan setelah sampel disentrifugasi.
bahan
Wadah untuk pengumpulan sampel tinja (Sumber: Bobjgalindo via Wikimedia Commons)
- Siapkan larutan seng sulfat dengan kepadatan 1,18 atau 1,2 g / ml jika sampel telah diolah sebelumnya.
- Siapkan rak dengan tabung reaksi berlabel sebelumnya.
- Memiliki mesin sentrifugal.
- Siapkan kaca mikroskop dan kaca penutup. Semua harus diberi label
- Pastikan larutan Lugol tersedia untuk menodai seprai.
- Saringlah kain kasa.
- Memiliki corong dan air suling.
- Cari wadah plastik atau karton berlabel.
- Juga aplikator dan gagang steril 5 mm.
- Pemantik api untuk mensterilkan gagang.
Langkah
Pemeriksaan makroskopis dan mikroskopis
Untuk setiap pemeriksaan feses, pemeriksaan dimulai dengan apa yang disebut "pemeriksaan kasar" dari sampel.
Konsistensi, warna, keberadaan apa yang tampak seperti darah, keberadaan lendir, dan keberadaan parasit dewasa dijelaskan.
Kemudian kita lanjutkan ke "pemeriksaan mikroskopis" pada feses, ini tergantung metodenya. Yang paling sederhana adalah metode hapusan langsung, yang merupakan metode pengamatan mikroskopis paling sederhana untuk parasit.
Foto pengamatan Gardia lamblia, parasit usus (Sumber: Riddlemaster via Wikimedia Commons)
Prosedur ini melibatkan penempatan sejumlah kecil sampel langsung pada slide. Tempatkan beberapa tetes larutan garam yang ukurannya harus serupa dengan sampel. Campur larutan garam dengan tinja sampai terbentuk campuran yang homogen. Letakkan kaca penutup dan periksa di bawah mikroskop.
Teknik Faust Asli
Prosedur kedua terdiri dari metode float Faust, yang versi aslinya terdiri dari:
1- Tempatkan sekitar dua gram feses dalam wadah yang sesuai untuk tujuan ini.
2- Tambahkan 30 ml larutan flotasi seng sulfat yang membuat emulsi dengan mencampurkan larutan dengan tinja.
3- Saring dengan saringan logam ke dalam wadah kedua dan pindahkan ke tabung reaksi.
4- Tambahkan lebih banyak larutan flotasi sampai meniskus terbentuk di dalam tabung.
5- Tempatkan penutup kaca pada meniskus. Biarkan istirahat selama 10 hingga 15 menit.
6- Lepaskan kaca penutup dan letakkan di atas kaca objek yang akan diperiksa di bawah mikroskop.
Teknik Faust dengan sentrifugasi
Awalnya metode ini tidak menggunakan sentrifugasi, namun sekarang dimasukkan karena diperoleh hasil yang lebih baik. Teknik tersebut melibatkan serangkaian langkah untuk mencapai prosedur yang tepat, yaitu sebagai berikut:
1- Feses dicuci bersih dengan air, diaduk rata lalu disaring dengan kain kasa yang dilipat empat. Sampel ditempatkan dalam tabung reaksi.
2- Centrifuge dan angkat supernatan (sampel yang disimpan di atas air). Langkah 1 dan 2 diulangi sampai supernatan "bersih".
3- Seng sulfat ditambahkan ke sampel yang disaring dan disentrifugasi.
4- Ini bercampur dengan baik.
5- Centrifuge lagi selama 1 menit pada 2500 rpm (putaran per menit).
6- Supernatan diambil kembali dengan loop steril sekitar 5mm; tabung tidak boleh diguncang.
7- Sampel yang diambil dari supernatan ditempatkan pada slide dan setetes Lugol dapat ditempatkan untuk diwarnai, penutup penutup ditempatkan dan diamati di bawah mikroskop.
8- Wadah dan tabung reaksi diberi label.
Keuntungan
- Unsur-unsur yang digunakan untuk diagnosis dapat terlihat bersih dan tanpa “detritus”, ini memudahkan pengamatan lembar dan mengurangi waktu yang digunakan untuk diagnosis.
- Dalam supernatan, baik larva, telur dan / atau kista ditemukan.
- Ini adalah metode biaya yang sangat rendah.
- Prosedurnya sangat sederhana dan mudah diterapkan.
- Diagnosisnya cepat dan akurat.
- Karena pentingnya dan tingginya insiden parasitosis di negara-negara miskin, metode berbiaya rendah dan mudah digunakan ini ideal untuk diagnosis dan pemantauan patologi ini.
Kekurangan
Kepadatan larutan flotasi menghasilkan kontraksi larva, yaitu menyusut dan, dalam waktu yang sangat singkat, dapat berubah bentuk. Hal ini memaksa pemeriksa untuk segera membuat diagnosis dan sampel yang dirawat tidak dapat disimpan untuk pemeriksaan selanjutnya.
Seperti semua metode identifikasi mikroskopis, staf pemeriksa yang sangat berpengalaman diperlukan untuk membuat diagnosis yang akurat.
Deformasi cepat dari elemen-elemen yang diperlukan untuk diagnosis, meskipun merupakan kerugian yang nyata, dapat dikoreksi dengan melakukan observasi mikroskopis segera.
Referensi
- Ananias, FL (2017). Evaluasi sensitivitas metode Faust dan sedimentasi spontan untuk diagnosis giardiasis. Jurnal Kedokteran Tropis Kuba, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Evaluasi komparatif dari teknik flotasi seng sulfat yang dimodifikasi. Jurnal mikrobiologi klinis, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Sensitivitas dan efisiensi metode-metode koproskopi yang dipilih-sedimentasi, kombinasi seng sulfat sedimentasi-flotasi, dan metode McMaster. Penelitian parasitologi, 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Diagnosis laboratorium parasit dari saluran gastrointestinal. Ulasan mikrobiologi klinis, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). Modifikasi metode flotasi sentrifugal seng sulfat untuk pemulihan sel telur cacing dalam feses yang diformalin. Jurnal Parasitologi, 28 (4), 345-346.