KALDU SELENITE: ALAS BEDAK, PERSIAPAN DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2025

The Selenite adalah media kultur cair selektif. Ini dirancang oleh Leifson untuk pengayaan sampel di mana dicurigai adanya bakteri enteropatogen dari genus Salmonella.

Media ini sesuai dengan persyaratan American Public Health Association (APHA), dan karena itu diterima untuk penyelidikan keberadaan Salmonella dalam sampel tinja, urin, makanan cair atau padat, air, dan lain-lain.

Kaldu selenite. Sumber: Foto diambil oleh penulis MSc. Marielsa gil

Komposisi kimianya mendukung pemulihan mikroorganisme ini dan pada gilirannya menghambat pertumbuhan mikroorganisme lainnya. Ini terutama beracun bagi sebagian besar bakteri yang termasuk dalam Keluarga Enterobacteriaceae. Namun, ini juga memungkinkan pemulihan strain Shigella dan tidak menghambat pertumbuhan Pseudomonas dan Proteus.

Ini terdiri dari natrium hidrogen selenit anhidrat, natrium fosfat anhidrat, pepton, dan laktosa. Ada juga varian yang ditambahkan sistin, oleh karena itu namanya kaldu selenite-sistin.

Saat ini, penggunaan kaldu selenite-sistin lebih disukai, karena persentase perolehan Salmonella yang lebih tinggi diperoleh, setara dengan yang diamati dengan media selektif lain untuk tujuan yang sama, seperti kaldu natrium tetrationat.

Dasar

Pepton yang terkandung dalam kaldu berfungsi sebagai nutrisi untuk perkembangan mikroorganisme yang tepat. Strain salmonella menggunakan pepton sebagai sumber nitrogen, vitamin, dan asam amino.

Laktosa adalah karbohidrat yang dapat difermentasi, sedangkan natrium selenite adalah zat penghambat yang menghentikan pertumbuhan bakteri Gram positif dan sebagian besar bakteri yang ada di flora usus, terutama dari Famili Enterobacteriaceae. Sodium fosfat adalah buffer yang menstabilkan pH medium.

Dalam kasus varian kaldu selenite yang mengandung L-cystine, senyawa tambahan ini merupakan agen pereduksi yang meminimalkan toksisitas selenite, meningkatkan pemulihan Salmonella.

Persiapan

- Kaldu selenite

Jika Anda memiliki komponen campuran, Anda dapat menimbang:

4 g natrium hidrogen selenit anhidrat.

10 g natrium fosfat anhidrat.

5 g pepton.

4 gram laktosa

Larutkan senyawa dalam 1 liter air suling steril. Itu bisa dipanaskan sedikit sampai larut sepenuhnya.

Beberapa laboratorium memaparkan media selama 10 menit dalam uap lancar untuk mensterilkannya, karena media tidak boleh diautoklaf. Jika medianya sudah disterilkan, bisa disimpan di lemari es sampai digunakan.

Itu juga dapat dibuat tidak steril dan disajikan langsung 10 sampai 15 ml ke dalam tabung reaksi steril.

Dalam hal ini harus dibiarkan istirahat dan segera digunakan. Karena medianya tidak steril maka tidak dapat disimpan di lemari es untuk digunakan nanti.

- Persiapan lingkungan komersial

Jika media komersial tersedia, timbang 23 g media dehidrasi dan larutkan dalam satu liter air suling steril. Panaskan sebentar untuk menyelesaikan pelarutan. Jangan autoclave. Sajikan secara aseptik 10 atau 15 ml dalam tabung reaksi steril.

PH akhir media harus 7,0 ± 0,2.

Perlu dicatat bahwa warna media dehidrasi adalah krem ​​dan sediaannya berwarna kuning terang dan tembus cahaya.

Varian kaldu selenite-cystine

Ini mengandung senyawa yang sama dengan kaldu selenite, tetapi 10 mg sistin ditambahkan. Prosedur selanjutnya sama persis seperti yang dijelaskan di atas.

Aplikasi

Media ini khusus untuk digunakan dalam studi epidemiologi, dalam kasus di mana penyakit belum dalam tahap akut, pasien tanpa gejala atau pembawa yang sehat.

Isolasi dari genus Salmonella umumnya sulit, karena biasanya hanya sampel yang tidak terkontaminasi dengan baik. Karena jumlahnya kecil, mudah tumpang tindih dengan pertumbuhan genera bakteri lain yang ditemukan dalam jumlah lebih banyak.

Di sisi lain, bahan baku pembuatan makanan olahan sering kali terpapar panas, proses dehidrasi, penggunaan disinfektan, radiasi dan pengawet, antara lain.

Oleh karena itu, Salmonellas yang ada dalam bahan mentah diperlakukan salah dengan menggunakan produk melalui proses industri yang disebutkan di atas. Demikian juga, dalam kasus sampel klinis seperti tinja, strainnya mungkin lemah jika berasal dari pasien yang telah diobati dengan antibiotik.

Oleh karena itu, setiap sampel yang diduga ada Salmonella harus diperkaya terlebih dahulu dalam kaldu laktosa, dan kemudian diperkaya dengan kaldu selenite untuk mengoptimalkan pemulihannya dalam media selektif, seperti agar SS, agar xilosa, lisin deoksikolat (XLD). ), enteric Hektoen agar (HE) dan agar hijau cerah, antara lain.

Ditabur

Untuk sampel tinja, ambil 1 g sampel dan masukkan ke dalam tabung berisi 10 hingga 15 ml kaldu selenite. Jika fesesnya cair, ambil 1 ml dan masukkan ke dalam kaldu. Untuk penyeka rektal, buang bahan usap ke dalam kaldu.

Dalam sampel makanan padat ambil 1 gr dan masukkan ke dalam kaldu selenite.

Dalam makanan cair campur dalam bagian yang sama dengan kaldu selenite pada konsentrasi ganda.

Untuk sampel urin, sentrifus, buang supernatannya, ambil semua endapannya dan taruh di kaldu selenite.

Kaldu diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam inkubasi. Pertumbuhan bakteri dibuktikan dengan kekeruhan. Tabung tambahan per sampel juga dapat dimasukkan untuk inkubasi pada 42 ° C. Selanjutnya dilakukan penyemaian media padat selektif dari kaldu selenite.

QA

Untuk mengontrol kemandulan, kaldu selenite dari setiap batch yang tidak diinokulasi diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam. Diharapkan tidak ada kekeruhan atau perubahan warna media.

Strain yang diketahui dapat digunakan untuk mengontrol berfungsinya media, seperti:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 dan Proteus mirabilis ATCC 43071.

Hasil yang diharapkan adalah:

• Untuk tiga strain bakteri pertama, pertumbuhannya harus memuaskan.
• Untuk penghambatan parsial Escherichia coli.
• Untuk pertumbuhan Proteus sedang.

Batasan

Media kaldu selenite beracun bagi kulit manusia, oleh karena itu kontak langsung harus dihindari.

Referensi

1. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J.Perbandingan antara media kultur natrium selenit dan natrium tetrathionat, keduanya diinkubasi pada suhu 37 ° C dan 42 ° C untuk isolasi Salmonella spp dari feses pembawa. Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
2. Laboratorium Britannia. Kaldu Selenito. 2015. Tersedia di: britanialab.com
3. Laboratorium Neogen. Kaldu selenite. Tersedia di: foodsafety.neogen.com
4. González -Pedraza J, Pereira -Sanandres N, Soto -Varela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. Isolasi mikrobiologis Salmonella spp. dan alat molekuler untuk mendeteksinya. Kesehatan, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Tersedia dari: http://www.scielo.org.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.