MACCONKEY AGAR: ALASAN, PERSIAPAN, DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2025

The agar MacConkey adalah media padat yang memungkinkan isolasi eksklusif bakteri gram negatif. Untuk alasan ini, ini adalah media selektif dan juga memungkinkan untuk membedakan antara basil fermentasi laktosa dan non-fermentasi, yang menjadikannya media diferensial. Ini adalah salah satu media kultur yang paling banyak digunakan di laboratorium mikrobiologi.

Media ini terutama digunakan untuk isolasi basil Gram negatif yang termasuk famili Enterobacteriaceae, termasuk jenis oportunistik dan enteropatogen.

Agar MacConkey diunggulkan dengan dua jenis bakteri. Koloni fermentasi laktosa sisi kiri, koloni fermentasi non-laktosa sisi kanan.

Juga dapat digunakan untuk mengisolasi basil enterik lain yang hidup di saluran cerna, tetapi tidak termasuk Enterobacteriaceae, seperti Aeromonas sp, Plesiomonas sp, dan lain-lain.

Akhirnya, dapat mengisolasi basil Gram-negatif non-glukosa-fermentasi yang ditemukan di lingkungan, air atau tanah, tetapi kadang-kadang dapat menjadi patogen oportunistik seperti Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, dan lain-lain.

Dasar

Agar MacConkey

Fondasi media ini dapat dijelaskan melalui uraian komponen-komponennya, karena masing-masing memiliki tujuan yang menentukan sifat-sifatnya.

Garam empedu dan kristal violet

Dalam pengertian ini, agar MacConkey memiliki komposisi yang kompleks. Pertama-tama mengandung garam empedu dan kristal violet.

Unsur-unsur ini bertanggung jawab untuk menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan beberapa basil Gram negatif yang rewel. Pada gilirannya, ini mendukung perkembangan basil Gram negatif yang tidak terpengaruh oleh zat ini. Oleh karena itu, ini adalah media selektif.

Dikatakan sedikit selektif dibandingkan dengan media lain yang juga menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan juga sebagian besar bakteri Gram negatif.

Pepton, polipekton, dan laktosa

Ini mengandung zat yang memberikan nutrisi yang diperlukan bagi mikroorganisme yang berkembang di lingkungan ini, seperti pepton, polipekton dan laktosa.

Laktosa merupakan kunci utama agar media menjadi media diferensial, karena mikroorganisme yang memiliki kemampuan untuk memfermentasi laktosa akan membentuk koloni berwarna merah muda yang kuat.

Beberapa bakteri dapat memfermentasi laktosa secara perlahan atau lemah, mengembangkan koloni berwarna merah muda pucat dan tetap positif laktosa.

Mereka yang tidak memfermentasi laktosa menggunakan pepton sebagai sumber energi, menghasilkan amonia, media alkali. Oleh karena itu, koloni yang berasal tidak berwarna atau transparan.

Indikator PH

Perubahan warna ini dicapai melalui senyawa esensial lain yang dimiliki agar MacConkey. Senyawa tersebut merupakan indikator pH, yang dalam hal ini berwarna merah netral.

Fermentasi laktosa menghasilkan produksi asam campuran. Mereka mengasamkan medium hingga pH di bawah 6,8.

Ini menyebabkan indikator pH berubah menjadi rona merah muda tua. Intensitas warna dapat bervariasi tergantung pada pH akhir.

Air suling, natrium klorida, dan agar

Di sisi lain, ia mengandung air suling dan natrium klorida yang memberikan hidrasi medium dan keseimbangan osmotik. Terakhir, media mengandung agar-agar, yang merupakan alas yang memberikan konsistensi media padat.

Media agar MacConkey yang sudah disiapkan harus memiliki pH akhir yang disesuaikan dengan 7,1 ± 0,2.

Persiapan

Untuk satu liter agar MacConkey, 50 g media dehidrasi harus ditimbang, kemudian ditempatkan dalam labu dan dilarutkan dalam satu liter air suling. Setelah 10 menit didiamkan, dipanaskan sambil diaduk terus sampai mendidih selama 1 menit.

Labu kemudian ditempatkan dalam autoclave dan disterilkan pada 121 ° C selama 20 menit. Pada akhir waktu, itu dikeluarkan dari autoclave dan dibiarkan dingin sampai mencapai suhu 45 ° C, untuk kemudian disajikan dalam cawan Petri steril di dalam penutup aliran laminar atau di depan pembakar Bunsen.

Biarkan mengeras dan simpan dalam dudukan piring terbalik dan dinginkan dalam lemari es pada suhu 2-8 ° C sampai digunakan.

Untuk mendapatkan agar MacConkey yang menghambat efek swarning yang dihasilkan oleh genus Proteus, agar MacConkey rendah garam digunakan.

Penggunaan agar MacConkey konvensional

MacConkey Agar disertakan dalam semua set media kultur yang diatur untuk penyemaian sampel klinis yang diterima di laboratorium. Ini juga berguna dalam mikrobiologi makanan dan mikrobiologi lingkungan.

Variasi batang Gram negatif yang tumbuh di media ini mengekspresikan karakteristik fenotipik yang membantu membuat diagnosis dugaan spesies yang bersangkutan. Misalnya ukuran, warna, konsistensi dan bau koloni, adalah beberapa ciri yang dapat menjadi pedoman.

Pada medium ini spesies Escherichia coli, Klebsiella sp dan Enterobacter sp menghasilkan koloni berwarna merah muda yang kuat, dikelilingi oleh zona endapan empedu.

Sedangkan bakteri seperti Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp dan Hafnia sp dapat tampak tidak berwarna setelah 24 jam atau berwarna merah muda pucat dalam 24 -48 jam.

Genera Proteus, Edwadsiella, Salmonella dan Shigella juga menghasilkan koloni yang tidak berwarna atau transparan.

Varian lain dari agar MacConkey

Ada varian MacConkey Agar lainnya yang memiliki kegunaan khusus. Mereka disebutkan di bawah ini:

Agar MacConkey dengan sorbitol

Media ini dirancang untuk membedakan strain enteropatogenik (enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7) dari strain Escherichia coli lainnya.

Media ini menukar karbohidrat laktosa dengan sorbitol. Strain E. coli enterohemoragik O157: H7 berbeda dari yang lain karena tidak memfermentasi sorbitol dan oleh karena itu diperoleh koloni transparan, sedangkan strain E. coli lainnya memfermentasi sorbitol dan koloni berwarna merah muda kuat.

Agar MacConkey tanpa kristal violet, atau garam

Agar ini sangat berbeda dari agar MacConkey klasik, karena tidak memiliki kristal violet dan bakteri Gram positif dapat tumbuh.

Di sisi lain, ketiadaan garam menghambat munculnya swarming pada agar-agar yang dihasilkan oleh beberapa basil enterik, seperti yang dari genus Proteus, dan dengan demikian memfasilitasi isolasi semua bakteri yang ada, termasuk bakteri Gram positif.

Agar MacConkey dengan cefoperazone

Varian agar MacConkey ini awalnya dirancang untuk mengisolasi Laribacter hongkongensis dan kemudian terbukti berguna untuk isolasi Arcobacter butzleri. Keduanya adalah batang Gram negatif yang sedikit melengkung yang tahan terhadap zona cefopera.

Bakteri ini baru-baru ini dikaitkan dengan penyebab gastroenteritis dan diare yang didapat pada individu Asia dan Eropa, muncul sebagai dua patogen baru yang kuat.

Antibiotik memungkinkan untuk menghambat flora yang menyertai dari saluran pencernaan, yang mendukung perkembangan bakteri ini, mencegahnya agar tidak diketahui, karena mereka membutuhkan 72 jam untuk tumbuh.

Agar MacConkey disiapkan dengan air laut pada 10% v / v

Varian ini berguna untuk evaluasi indikator sanitasi bakteri dari kontaminasi tinja, termasuk total coliforms dan fecal coliforms di perairan asin rekreasi (pantai dan teluk).

Cortez dkk pada tahun 2013 menunjukkan bahwa media yang disiapkan dengan cara ini secara signifikan meningkatkan pemulihan mikroorganisme ini di lingkungan garam, dibandingkan dengan penggunaan agar MacConkey yang dibuat dengan air suling.

Hal ini disebabkan karena media yang dimodifikasi tersebut merangsang pertumbuhan bakteri yang secara fisiologis berada dalam keadaan laten “viable but non-cultureable”, sehingga tidak dapat diperoleh kembali pada media konvensional.

Referensi

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, dkk. Penggunaan agar MacConkey cefoperazone untuk isolasi selektif Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. Agar MacConkey. Wikipedia, ensiklopedia gratis. 4 Apr 2018, 18:16 UTC. 29 Des 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Editorial Panamericana SA
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologis. (Edisi ke-5). Argentina, Editorial Panamericana SA
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Pengaruh media kultur yang disiapkan dengan air laut pada indikator kesehatan di perairan laut spa di Chichiriviche, negara bagian Falcón, Venezuela. Pendeta Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Mikrobiologi klinis praktis. University of Cadiz, edisi ke-2. Layanan Publikasi UCA.