AGAR TEPUNG JAGUNG: LATAR BELAKANG, PERSIAPAN DAN PENGGUNAAN - BIOLOGI - 2025

The makan jagung agar adalah medium kultur yang solid, kekuatan gizi rendah, berguna untuk subkultur jamur tertentu dan untuk menunjukkan chlamydospores di strain Candida albicans kompleks. Dalam bahasa Inggris dikenal dengan nama Corn Meal Agar.

Media tepung jagung konvensional memiliki komposisi yang sangat sederhana yaitu berisi tepung jagung, agar-agar dan air. Karena tingkat gizinya yang rendah, sangat ideal untuk digunakan dalam pemeliharaan strain jamur untuk jangka waktu sedang, terutama jamur hitam.

A. Representasi grafis dari Candida albicans Complex pada agar tepung jagung. B. Chlamydospores dari Candida albicans Complex terlihat di bawah mikroskop, terbentuk pada agar tepung jagung. Sumber: A.GrahamColm / B. Oleh: CDC / Dr. William Kaplan, Sumber: Perpustakaan Gambar Kesehatan Masyarakat.

Sporulasi kompleks Candida albicans lebih disukai dalam media ini, jika 1% Tween 80 ditambahkan selama pembuatan agar. Pembentukan klamidospora adalah karakteristik spesies ini dan praktis satu-satunya yang mempengaruhi manusia.

Ada spesies lain yang membentuk klamidospora, tetapi kecil kemungkinannya untuk menyerang manusia, seperti Candida australis, yang terdapat pada kotoran penguin, atau C. clausenii, yang merupakan saprofit yang jarang ditemui. Demikian pula, spesies C. stellatoidea dan C. tropicalis dapat membentuk mereka.

Di sisi lain, penambahan glukosa ke media tepung jagung membantu pembentukan pigmen dalam strain Trichophytom rubrum.

Penting untuk disoroti bahwa ada jamur yang tidak membentuk hifa atau pseudohyphae pada agar tepung jagung, seperti Cryptococcus neoformans, berbeda dari genera lain.

Tepung jagung agar bisa dibuat sendiri di laboratorium atau media komersial juga bisa digunakan.

Dasar

Tepung jagung adalah substratnya, agar-agar adalah zat pemadat, dan air adalah pelarutnya.

Agar tepung jagung dapat ditambah dengan tween 80 (sorbitan monooleat atau polysorbate polyester 80). Senyawa ini mengurangi tegangan permukaan medium karena kekuatan pengemulsi nya.

Ini juga menciptakan lingkungan yang tidak bersahabat yang menghambat penggandaan sel yang berlebihan dan merangsang pertumbuhan hifa, juga mendukung produksi klamidospora; yang terakhir dianggap sebagai struktur resistensi. Struktur ini membantu dalam identifikasi spesies Candida albicans.

Sementara itu, glukosa dalam media ini meningkatkan kapasitas pembentukan pigmen pada beberapa jamur.

Perlu dicatat bahwa media tepung jagung dengan glukosa tidak berguna untuk demonstrasi klamidospora dalam kompleks Candida albicans.

Persiapan

Persiapan Agar Tepung Jagung Buatan Sendiri

Timbang 47 g tepung jagung kuning dan larutkan dalam 500 ml air suling. Panaskan sampai 60 ºC, sambil diaduk selama kurang lebih 1 jam. Kemudian saring melalui selembar kain kasa dan kapas, secara opsional dapat disaring kembali dengan melewatkan persiapan melalui kertas saring Whatman No. 2.

Tingkatkan volume menjadi 1000 ml dengan air suling. Tambahkan 17 g agar-agar, panaskan hingga larut. Autoclave selama 15 menit pada 121 ºC.

Sajikan dalam cawan Petri steril. Simpan di lemari es.

Warna media yang disiapkan adalah keputihan dengan tampilan tidak rata.

Jika Anda ingin menyiapkan tepung jagung dengan glukosa untuk sediaan yang dijelaskan di atas, tambahkan 10 g glukosa.

Agar tepung jagung komersial

Timbang 17 g media dehidrasi dan larutkan dalam 1 liter air suling. Campuran dapat dipanaskan, dikocok perlahan hingga larut sepenuhnya. Sterilkan dalam autoklaf pada 121 ºC, pada 15 lb, selama 15 menit.

Tuang ke dalam cawan Petri steril. Biarkan mengeras. Balik dan simpan di lemari es sampai digunakan. Temper sebelum digunakan.

PH harus 6,0 ± 0,2 pada 25 ºC.

Agar tepung jagung dengan Tween 80

Untuk memenuhi ISO 18416, agar tepung jagung harus disiapkan sebagai berikut:

Timbang 65 gram per liter dan tambahkan 10 ml Tween 80. Panaskan dan rebus selama beberapa menit hingga larut, hati-hati jangan sampai terlalu panas. Sterilkan pada 121 ºC selama 15 menit.

Agar tepung jagung dengan glukosa

Untuk meningkatkan daya kromogenik koloni Trichophyton rubrum dan membedakannya dari T. mentagrophytes, glukosa 0,2% dapat ditambahkan ke formula asli. Anda tidak perlu mengonsumsi Tween 80, karena glukosa menghambat pembentukan klamidospora.

Menggunakan

Terutama, penggunaan agar tepung jagung ditujukan untuk studi strain Candida, membantu identifikasi mereka melalui pengamatan karakteristik klamidospora pada spesies albicans. Artinya, penggunaan agar-agar ini berfungsi sebagai metode tambahan untuk identifikasi khamir tersebut.

Baik spesies saprofitik maupun patogen dapat berkembang pada agar-agar ini, tetapi masing-masing membentuk struktur miselium yang khas. Misalnya, spesies dari genus Torulopsis tidak menghasilkan miselium dan berkembang biak hanya dengan blastoconidia.

Demikian pula, spesies Trichosporon dan Geotrichum menghasilkan arthroconidia pada agar tepung jagung dan terkadang sulit untuk membedakan antara yang satu dengan yang lainnya.

Arthroconidia dari genus Geotrichum menghasilkan perpanjangan hifa yang menyerupai tongkat hoki.

Juga produksi pigmen menggunakan agar tepung jagung ditambah dengan glukosa berguna dalam identifikasi Trichophytom rubrum.

Ditabur

Koloni Candida yang mencurigakan yang diperoleh pada media kultur primer - agar Sabouraud - dari sampel klinis, kosmetik, tanah, antara lain, disubkultur pada agar tepung jagung. Media diunggulkan dan diinkubasi pada suhu 22 ° C selama 24 hingga 48 jam. Waktu inkubasi bisa diperpanjang jika perlu.

Demonstrasi klamidospora

Untuk tujuan ini, agar tepung jagung dengan Tween 80 harus diinokulasi menggunakan teknik Dalmau. Metode ini terdiri dari mengambil sebagian dari koloni yang dicurigai dengan gagang platina dan membuat tiga potongan paralel di tengah, dengan pegangan pada 45º. Potongan harus dipisahkan dengan jarak 1 cm satu sama lain.

Selanjutnya, benda penutup yang telah dinyalakan sebelumnya ditempatkan pada coretan yang telah disemai, sedemikian rupa sehingga setengahnya tertutup dan yang lainnya tidak tertutup.

Inkubasi pelat unggulan pada suhu 30 ° C selama 48-72 jam dan kemudian periksa di bawah mikroskop melalui kaca penutup.

Pemeliharaan strain jamur

Untuk pemeliharaan galur, piring yang dibibitkan dan ditanam disimpan di lemari es (4 hingga 8 ºC). Dengan cara ini mereka dapat bertahan beberapa minggu dan digunakan untuk tujuan pengajaran atau penelitian.

QA

Untuk pengendalian sterilitas plat diinkubasi tanpa inokulasi pada suhu kamar, diharapkan tidak terjadi pertumbuhan atau perubahan warna.

Untuk kontrol kualitas, strain yang diketahui dapat disemai seperti: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

Hasil yang diharapkan adalah penghambatan parsial untuk S. aureus dan E. coli. Sedangkan pertumbuhan yang memuaskan diharapkan pada sisa strain.

Aspergillus niger tumbuh dengan koloni hitam dan bersporulasi dalam waktu kurang lebih 5 hari inkubasi.

Koloni jamur Candida albicans dengan produksi klamidospora.

Saccharomyces cerevisiae menghasilkan sel jamur yang besar.

Batasan

Endapan kuning terbentuk di bagian bawah lempeng yang tidak sama dengan koloni.

Referensi

1. Laboratorium Neogen. Corn Meal Agar. Tersedia di: foodsafety.neogen.com.
2. Microkit Media Budaya. Corn Meal Agar. Tersedia di: Medioscultivo.com.
3. Linares M, Panduan Identifikasi Ragi Solís F. Tersedia di: http: //www.guia.revibero.
4. Urcia F, Guevara M. Rev. Perú Med.Exp. Kesehatan Masyarakat, 2002; 19 (4): 206-208. Tersedia di: Scielo.com
5. Casas-Rincón G.Mikologi Umum. 1994. Edisi ke-2 Universitas Pusat Venezuela, Edisi Perpustakaan. Venezuela Caracas.
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologis Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis Mikrobiologis. Edisi ke-5. Editorial Panamericana SA Argentina.
8. Castillo E. Studi perbandingan beberapa metode makro dan mikroskopis untuk isolasi dan pengenalan genus Candida. Pendeta Ilmu Kimia Farmasi Kolombia. 1970; 3 (1): 33-57. Tersedia di: Ciencias.unal.edu.co